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硝化细菌的分离与鉴定 硝化细菌的分离与鉴定 PAGE / NUMPAGES 硝化细菌的分离与鉴定 Evaluation Only. Created with Aspose.PDF. Copyright 2002-2020 Aspose Pty Ltd. 硝化细菌的分离与鉴定 要筛选生长速度快、硝化作用强的硝化细菌用于水产养殖水处理。硝化细 菌包括亚硝化 菌和硝化菌两个生理菌群，分别可将水中的氨态氮转化为亚硝酸盐和硝酸 盐。实验结果 表明经 5 周培养，亚硝化菌可使培养液中的氨氮含量下降到 60％，硝化菌 可使培养液中的 亚硝酸盐含量下降到 6 0％。实验可通过测定培养液中亚硝酸盐的含量变化 来测定细菌的 氨转化作用或硝化作用。 关键词：硝化菌，亚硝化菌，硝化作用，筛选。 氨氮和亚硝酸盐都是在水产养殖过程中产生的有毒物质，且亚硝酸盐还是 强烈的治癌物 质，因此如何降解这两种物质，是科学工作者近年来的工作重点。 硝化细菌是一类具有硝化作用的化能自养菌，包括硝化菌和亚硝化菌两个 生理菌群，其 主要特性是自养性，生长速率低，好氧性，依附性和产酸性等。可通过 NH4+→NO2-→ NO3-这一过程将 NH4+转化为 NO3-。能有效降低水体中氨氮及亚硝酸氮的 含量，对水产养 殖业及环境保护具有重要意义。硝化细菌是生物硝化脱氨中起主要作用的 微生物，直接 影响硝化效果和生物脱氨的效率。 1 / 11 Evaluation Only. Created with Aspose.PDF. Copyright 2002-2020 Aspose Pty Ltd. 研究表明，水体中硝化细菌的浓度对生物脱氨具有十分重要的意义，由于 大多数硝化细 菌生长缓慢，硝化及脱氨效果欠佳，处理水产养殖污水的效果不是很好。 因此筛选出生 长速率高硝化作用强度大的硝化细菌有很大的用途。 本文对硝化细菌的研究主要在富集培养和固定化细胞方面，能够有效提高 硝化细菌的产 率和硝化细菌的利用率。通过富集培养的硝化细菌浓度是未经富集培养的 ～20.0 倍 ，利用细胞固定化技术可使氨氮去除率提高 16.5 个百分点。国外在硝化细 菌的培养方面 的研究已有一些专利技术，其中一些已形成工业化生产，但产品价格较昂 贵，并且必须 不断向反应器中补充流失的硝化细菌。硝化作用包括两个步骤：氨转化为 亚硝酸盐和亚 硝酸盐转化为硝酸盐，这两个步骤分别由亚硝化菌和硝化菌完成，至今还 未发现有能将 氨直接转化为硝酸盐的细菌。 氨和亚硝酸分别是亚硝化菌和硝化菌的唯一能源。对于硝化细菌来说生长 环境中的温度 对其影响较大， pH 值和盐度的影响相对较小。大多数硝化细菌的合适生长 温度为 10～38 1 ℃ ，高于 2 0℃ 时硝化细菌的活性较高，但超过 38℃ 消化作用将会消失。当 环境气温低于 2 / 11 Evaluation Only. Created with Aspose.PDF. Copyright 2002-2020 Aspose Pty Ltd. 20℃ 时，氨的转化会受到影响。 一般认为，适宜硝化菌和亚硝化菌生长介质的 pH 值分别为 6.0～8.5 和 ～8.0。水体 DO的高低影响到好氧、厌氧微生物的比例，大多数研究人员认 为 DO 的浓度应当控制在 1.0～ mg/L，低于 0.5 mg/L 时硝化作用明显减弱。另外，碳氮比、碱度等对硝 化及脱氨均 有影响。 本文中筛选硝化细菌的依据主要是生长速率和硝化作用强度，生长速率主 要采用活菌计 数，因为硝化细菌的液体培养基中有沉淀，用 OD600测的值误差较大。氨 转化效率和硝化 作用强度主要用比色法测定，利用亚硝酸根的显色反应。亚硝化菌测定其 培养液中亚硝 酸根的增加量，硝化菌测定其亚硝酸根的减少量。 1 材料和方法 实验材料 菌种 由海洋中分离得到 培养基 亚硝化菌培养基 (NH4)2SO4 0.5g NaCl 0.3g FeSO4#8226;7H2O 0.03g K2HPO4 1g MgSO4#8226;7H2O 0.03g CaCl2 7.5蒸g 馏水 1000ml PH自然固体培养基加 5％琼脂硝 3 / 11 Evaluation Only. Created with Aspose.PDF. Copyright 2002-2020 Aspose Pty Ltd. 化菌培养基 NaNO2 1g MgSO4#8226;7H2O 0.03g MnSO4#8226;4H2O 0.01g K2HPO4 g Na2CO3 1g NaH2PO4 0.25蒸g 馏水 1000ml PH自然固体培养基加 5％琼 脂肉汤培 养基牛肉膏 0.5％蛋白胨 1％氯化钠 0.5％琼脂 2％ 试剂 牛肉浸膏上海长阳生化制药厂蛋白胨上海东海制药厂