分子杂交技术.pptVIP

第三十页，共46页 白瓷盘 玻璃板 滤纸 凝胶 尼龙膜 滤纸 吸水纸 玻璃板 重物 吸水纸转膜 第三十一页，共46页 优点是简单,不需要用其他仪器。缺点是转移时间较长,转移后杂交信号较弱 第三十二页，共46页 （2）真空转移法 此法原理与毛细管虹吸法相同，只是以滤膜在下，凝胶在上的方式将其放置在一个真空室上，利用真空作用将转膜缓冲液从上层容器中通过凝胶和滤膜抽到下层真空室中，同时带动核酸片段转移到凝胶下面的尼龙膜或硝酸纤维素膜上。 第三十三页，共46页 第一页，共46页 第一节 分子杂交的原理 核酸分子杂交（nucleic acid hybridization） 指具有互补序列的两条核酸单链在一定条件下按碱基配对原则形成双链的过程。 分子杂交是通过配对碱基对之间的非共价键（主要是氢键）结合，从而形成稳定的双链区。杂交分子的形成并不要求两条单链的碱基顺序完全互补，所以不同来源的核酸单链只要彼此之间有一定程度的互补顺序（即某种程度的同源性）就可以形成杂交双链 第二页，共46页 不同来源的DNA或RNA单链在一定条件下重新组成的新的双链分子——杂交分子 若所用的核酸探针的片段较长(几百个核苷酸以上)，可以得到很准确的鉴定结果。但若人工合成的寡核苷酸探针片段较短（如20～30个核苷酸），则难免会出现准确性差的假阳性现象。 杂交的双方是待测核酸和已知核酸序