药代动力学和生物利用度.pptxVIP

药代动力学与生物利用度;药代动力学与生物利用度;药代动力学研究中的生物样品分析;2.稳定性 了解待测药物和内标物在不同pH、光照、溶剂、温度条件下稳定性 对于中药或多组分制剂，应注意他们的相互作用 体液中药物的稳定性包括室温、冷藏（2-8℃）、冻融、冷冻（-20--70℃）;3. 灵敏度：最低定量浓度 注意与检测限相区别 根据药物体内药物浓度确定 一般为3-5个半衰期或峰浓度的1/10-1/20 MS(pg) ﹥RF(ng)﹥UV(?g) ;4.选择性 待测药物及内标色谱峰均要与呈基线分离 内源性物质、药物的代谢物、可能的合并用药及中药中其他组分不干扰分析 提供对照品、空白生物样品、空白生物样品加对照品及用药后的生物样品色谱图 ;5.萃取回收率 一般要求大于50% 液-液萃取 固相萃取 蛋白沉淀、超滤;6.工作曲线及线性关系 做5个点以上，一般6-7个点 最高浓度与最低浓度比值应在50-500之间 浓度宽度应涵盖峰浓度和最低浓度 相关系数应大于0.99。;7.方法精密度与准确度 精密度包括日内精密度和日间精密度 一般要求应做5个点以上 准确度一般用相对回收率表示，应作5个点以上 RSD应小于10%，在LOQ附近应小于15% 生物制品RSD应小于15%，在LOQ附近应小于20% ;临床前药代动力学研究 ;2．实验动物 一般采用成年和健康的动物。常用动物有小鼠、大鼠、兔、豚鼠和狗等。 首选动物：应与药效学或毒理学研究一致。 尽量在清醒状态下实验，动力学研究最好从同一动物多次采样。 创新药应选用两种或两种以上的动物，其中一种为啮齿类动物；另一种为非啮齿类动物。其他类型的药物，可选用一种动物（建议首选非啮齿类动物，如犬或兔等）。 口服用药不宜选用兔子等食草类动物。 ;3．给药途径 所用的给药途径和方式，应尽可能与临床用药一致。 4．试验剂量 药代动力学研究至少应设三个剂量组，其中一个剂量应相当于药效学试验有效剂量，高剂量一般接近于最大耐受量(MTD)，以了解药物在体内的动力学过程是线性动力学还是非线性动力学。;5.灵敏度(sensitivity) 用最低检测浓度或定量限（limit of quantitation , LOQ）,如 ?g/ml或ng/ml等表示。 它是标准曲线上的最低浓度，要求能测至3～5???消除半衰期后或Cmax的1/10～1/20的血药浓度。 ;6．提取回收率（绝对回收率） 应考察高、中、低三个浓度的提取回收率 一般应高于50％。 ;7.特异性(specificity ) 必须能证明所测的物质为原形药物或活性代谢物，并能排除内源性物质、其它代谢物和杂质的干扰。 对于色谱法至少要提供标准品、空白样品、外加样品和用药后的样品色谱图。 ;;8.标准曲线（standard curve） 应分别制备药物在不同生物样品（如血、尿、粪、胆汁和组织匀浆等）中的标准曲线。 每条标准曲线至少包括5个浓度，并应覆盖整个生物样品的浓度范围，不得外推。 应提供标准曲线的线性方程和相关系数（要求色谱法的r?0.99，生物学方法r?0.98）。 ;;9.精密度(precision） 用日内和日间相对标准误差（relative standard deivation, RSD%）表示方法精密度。 要求在标准曲线范围内选用高（接近上限）、中、低（接近LOQ）三种浓度，每一浓度至少测定5个样品，求出各自的RSD（%）。 对?g/ml级水平的RSD应〈10% ，ng/ml级水平的RSD可〈15%。 ;10.准确度(accuracy） 用相对回收率(recovery）表示。 其测定与精密度类似应在标准曲线范围内选用高、中、低三种浓度，每一浓度至少测定5个样品。 ;11．实验设计 取样点的设计应兼顾到吸收相、分布相和消除相.根据研究样品的特性，取样点通常可安排9～13个点不等，即吸收相应取2～3个点，达峰浓度处取2～3点，分布相取2～3点，消除相取3～4个点 整个采样时间应持续到3～5个半衰期或到Cmax的1/10～1/20。 在非连续取样的动物试验中，每个时间点至少应有5只动物的数据;如经同一动物多次采样，每个时间点至少应有3只动物的数据。 口服给药，一般在给药前应禁食12小时以上。 ;特布他林浓度-时间曲线图;12．组织分布试验 一般选用小鼠或大鼠，选定一个有效剂量给药后，分别在吸收相、分布相和消除相各选一个时间点取样测定。 测定心、肝、肾、脾、肺、脑、胃、肠、子宫或睾丸、脂肪和肌肉等重要组织中的浓度，以了解药物在体内的主要分布组织，特别是效应靶器官和毒性靶器官的分布。 若某组织的药物浓度较高，应进一步研究消除的情况。每个时间点至少应有5个动物的数椐。 ;人体生物利用度和生物等效性研究 ;