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项 目 补体 C3 方 法 免疫比浊法 目 录 1．检测原理 2 ．标本采集与处理 2.1 受检者的准备 2.2 静脉采血 2.3 抗凝剂 2.4 标本处理 3 ．试剂 3.1 试剂 3.2 校准血清 3.3 试剂与校准血清的稳定性 4 ．仪器 5 ．操作 6 ．计算 7 ．操作性能 7.1 精密度 7.2 准确度 7.3 灵敏度 7.4 可报告范围 7.5 特异性 7.6 干扰 8 ．参考值 9 ．临床意义 附录 A: 参数 1. 检测原理 340nm 样本中 C3 + 试剂中的 C3 抗体 大分子免疫复合物 在 340nm 监测生成的复合物的浊度变化，与样本中 C3 含量成正比。 2. 标本采集与处理 2.1 受检者的准备： 病人空腹 12h ，不饮酒 24h 后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用 影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节 性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前 24 小时内不做剧烈运动。 2.2 静脉采血： 除非是卧床的病人， 一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布， 会影响测试项目的浓度。 在采血前至少应静坐 5 分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过 1 分钟，穿刺成功后立即松开 止血带。 2.3 抗凝剂： 不使用抗凝剂。 2.4 标本处理： 血标本室温放置 30min ～45min 后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测 完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖 2-8 ℃保存。 3 ．试剂 3.1 试剂： 本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司 C3 试剂盒，为液体双试剂，各组分如下： R1 ：PEG4 缓冲剂： 含高分子强化剂的磷酸盐缓冲剂。含有 0.095% 的叠氮化钠。 R2 ：C3 抗血清，含有 0.095% 的叠氮化钠。 3.2 ：校准血清 使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的多项免疫类标准液。其中包含 C3 定值。 校准频次： 空白定标：每日需做试剂空白定标。 全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的 2SD 范围，需要全点定标。 3.3 试剂与校准血清的稳定性： 原包装试剂储存在 2-8 ℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存 30 天。 试剂储存在 18-22 ℃稳定 28 天，试剂应避免污染。试剂 R1 颜色为无色，试剂 R2 颜色为无色至浅黄 色，当试剂变色，按照试剂失效处理。 多项免疫类标准液储存在 2-8 ℃至标签所示失效日期。第一次开启后，不要冷冻。在 2-8 ℃下将瓶盖拧 紧保存，标准品可以储存长达 6 个星期的时间。 4 ．仪器 KONELAB 30 型号仪器。 性能：波长 340nm ，仪器测定吸光度的灵敏度应达到 0.001ABS 以上。 5 ．操作 样品为血清。本法为免疫比浊法。参数见后附，附录 A 。 试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。 6 ．计算 计算吸光度的差值（ OD2 －OD1 ），并建立标准液吸光度－浓度工作曲线。 计算标本的吸光度差值，并在工作曲线上读取浓度值（ mg/dL ）。如标本的吸光度值大于标准液的最 大值，则需稀释标本后，重新测量。 7 ．操作