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基因工程基本操作流程图 基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤： 1. 目的基因的获取 2. 基因表达载体的构建 3. 将目的基因导入受体细胞 4. 目的基因的检测与鉴定 其中在第一步目的基因获取部分之前的内容意在指出获取 目的基因的三种方法，即从基因文库中获取目的基因、利用 PCR 扩增目的基因、人工合成目的基因。但书中的图不容易让人看懂， 教学中不妨对此图这部分稍作改动（如图）既可帮助学生梳理知 识，而且有助于后面 PCR 扩增目的基因的学习。 基因工程的基本操作步骤 人工合成 从基因文库中提取 利用 PCR技术扩增 第一步 从基因文库中获取 目的基因的获取 PCR技术扩增 鸟枪法 根据已知的 反转录 氨基酸序列 人工合成 合成 DNA 法 第二步 基因表达载体的构建 基因表达载体的组成： 复制原点 + 目的基因 +启动子 +终止子 + 标记基因 农杆菌转化法 植物 基因枪法 第三步 花粉管通道法 将目的基因导入受体细胞 动物 ：显微注射法 微生物 ：钙离子处理法 导入检测： DNA 分子杂交技术 ，即使 用放射性同位素标记的含目的基因 的 DNA 片段作探针检测。 第四步 分子水平检测 目的基因的检测与鉴定 表达检测 转录检测：分子杂交法， 翻译检测：抗原—抗体杂交法 对 转 基 因 生 物 进 行 抗 虫 或 个体生物学水平鉴定