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* * * * 2)转肽 P位上的肽链(此时还只有一个fMet)转移到A位上的Aa上,形成一种连接在tRNA上的n+1肽(此时还只是1+1肽)同时P位上tRNAf 成为空载。 a. 二Aa连接方式是fMet的-COOH与第二Aa的-NH2间的肽键。肽链延伸方向“头向生长”即N端Aa最先合成。 b. 需肽基转移酶、K+。肽酰转移酶是50S上固有蛋白质位点,需高浓度K+。 在大亚基的催化下,位于P为肽基tRNA上的肽链转移到A位的氨酰tRNA末端,加上一个新的氨基酸,形成一个新的肽基tRNA。此时P位为一个不携带任何氨基酸的脱氨酰化的tRNA。核糖体向前滑动,将脱氨酰化的tRNA挤出P位点,导致肽基tRNA重新位于P位点,暴露出下一个三联体密码子 空载tRNA在被挤出核糖体会在E位点短暂停留,实际顺序是A到P再到E。 * 转肽: 肽基转移酶,K+ Aa2-NH2 Aa2-NH-C-fMet-NH O O=CH A位 O-C-fMet-NH O O=CH 生长方向N?C * 嘌呤霉素作用: 嘌呤核苷酸衍生物-3′N-CO-Tyr(衍生物-NH-CO-Aa),其结构与 tRNA-CCA-OH-CO-Aa相似。不同在NH-CO键和酯键 嘌呤霉素与核糖体无连接部位,形成的肽酰-嘌呤霉素易脱落,pr合成中断。 故:嘌呤霉素抑制在于转肽步骤。同时从结构上也证明是头向生长(N ? C生长) 糖 1′? 4′尾向 脂CH3 ? COO 头向 NA 5′? 3′尾向 pr N ? C (tRNA) 头向 * 3)核糖体移位 移位是指核糖体在mRNA上沿5′?3′方向移动一个Codon的距离,它需要GTP和另一种延伸因子EFG。 EFG也叫“移位酶”,移位机理至今不清,移位后: 原在A位的二肽,实际位置到了70S的P位,原在P位的空载tRNA离开核糖体。 接着,第三个Aa-tRNA进入新的A位,开始下轮的进位,转肽,移位,从而使肽链不断延长为2肽,3肽,4肽…最后合成pr原。 * 移位 Aa2-fMet EFG GTP Aa2-fMet Aa3-tRNA A位 A位 * 1、当核糖体在mRNA上沿 5′? 3′方向不断移动中,如遇mRNA上出现终止Codon(UAA,UAG,UGA),则不再接受Aa-tRNA而由释放因子RF占据。 2、被肽酰转移酶水解下来的肽链释放入水相中 3、tRNA脱离 核糖体脱离并解体为30S + 50S 4、30S再与IF3结合(此可阻止与50S结合) 三、原核生物的翻译终止 释放因子有三种: RF1,识别UAA,UAG,占据A位,促进肽酰转移E变水解E RF2,识别UAA,UGA,占据A位,促进肽酰转移E变水解E RF3,协助肽链释放 * 终止 RF Aan……fMet RF 肽脱落 * 遗传信息的翻译 A G U C C A U A A G G U U A C 甲硫氨酸 G U G 组氨酸 A C C 色氨酸 * 遗传信息的翻译 A G U C C A U A A G G U U A C 甲硫氨酸 G U G 组氨酸 A C C 色氨酸 * 遗传信息的翻译 A G U C C A U A A G G U U A C 甲硫氨酸 G U G 组氨酸 A C C 色氨酸 * 遗传信息的翻译 A G U C C A U A A G G U U A C 甲硫氨酸 G U G 组氨酸 A C C 色氨酸 * 遗传信息的翻译 A G U C C A U A A G G U U A C 甲硫氨酸 G U G 组氨酸 A C C 色氨酸 肽键 * 遗传信息的翻译 A G U C C A U A A G G U 甲硫氨酸 G U G 组氨酸 A C C 色氨酸 * 遗传信息的翻译 A G U C C A U A A G G U 甲硫氨酸 组氨酸 色氨酸 X X X XXXX * 遗传信息的翻译 A G U C C A U A A G G U 甲硫氨酸 组氨酸 色氨酸 XXXX * Ribosome cycle * 活化每个氨基酸2个高能键,进位需要1个高能键,移位需要1个高能键。合成一个n肽所需能量:4n个高能键。 原核生物中,肽链的终止不需GTP, 合成过程是一个耗能过程 * 第四节 真核细胞蛋白质合成的特点 * 真核生物mRNA的结构 * 1. 核糖体为80S,由60S的大亚基和40S的小亚基组成 2. 起始密码AUG 3. 起始tRNA为Met-tRNA,且没有被甲酰化,称为tRNAiMet 4. 起始复合物结合在
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