基因工程常见几种酶比较.pdfVIP

几 种 酶 的 比 较 DNA 聚合酶： 在 DNA 复制时起作用，将多个脱氧核苷酸催化聚合为脱氧核苷酸链（也就是 DNA 单链）， 此时形成的化学键是磷酸二酯键。 DNA 解旋酶： 在 DNA 复制或转录时起作用，将 DNA 的双链解开，作用对象是氢键，使氢键断裂 DNA 水解酶： 在消化道或细胞内起作用，将 DNA 水解为脱氧核苷酸，作用对象是磷酸二酯键 DNA 连接酶： 在 DNA 修饰过程或基因工程中起作用，将两个 DNA 片段连接起来，此时形成的化学键是 磷酸二酯键。 下图为 DNA 分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性内切酶、 DNA 聚合酶、 DNA 连接酶、解旋酶作用的正确顺序是 复习资料：几种酶的比较 限制性核酸内切酶（以下简称限制酶） ：限制酶主要存在于微生物（细菌、霉菌等）中。 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割 DNA 分子。是特 异性地切断 DNA 链中磷酸二酯键的核酸酶（ 分子手术刀“ ”）。发现于原核生物体内，现已分 离出 100 多种，几乎所有的原核生物都含有这种酶。是重组 DNA 技术和基因诊断中重要的 一类工具酶。例如，从大肠杆菌中发现的一种限制酶只能识别 GAATTC 序列，并在 G 和 A 之间将这段序列切开。目前已经发现了 200 多种限制酶，它们的切点各不相同。苏云金芽 孢杆菌中的抗虫基因，就能被某种限制酶切割下来。在基因工程中起作用。 DNA 连接酶： 主要是连接 DNA 片段之间的磷酸二酯键， 起连接作用， 在基因工程中起 作用。 DNA 聚合酶： 主要是连接 DNA 片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，在 DNA 复 制中起做用。 DNA 聚合酶只能将 单个核苷酸加到已有的核酸片段 的 3 ′末端的羟基上，形成磷酸二酯 键；而 DNA 连接酶是在两个 DNA 片段之间 形成磷酸二酯键，不是在单个核苷酸与 DNA 片段之间形成磷酸二酯键。 DNA 聚合酶是以一条 DNA 链为模板， 将 单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条 与模板链 互补的 DNA 链；而 DNA 连接酶是将 DNA 双链上的两个缺口同时连接起来 。因此 DNA 连 接酶不需要模板。 RNA 聚合酶 （又称 RNA 复制酶、 RNA 合成酶）的催化活性： RNA 聚合酶以完整的双 链 DNA 为模板，转录时 DNA 的双链结构部分解开，转录后 DNA 仍然保持双链的结构。真 核生物 RNA 聚合酶： 真核生物的转录机制要复杂得多， 有三种细胞核内的 RNA 聚合酶：RNA 聚合酶 I 转录 rRNA ，RNA 聚合酶 II 转录 mRNA ，RNA 聚合酶 III 转录 tRNA 和其它小分子 RNA。在 RNA 复制和转录中起作用。 反转录酶： RNA 指导的 DNA 聚合酶，具有三种酶活性，即 RNA 指导的 DNA 聚合酶， RNA 酶， DNA 指导的 DNA 聚合酶。在分子生物学技术中，作为重要的工具酶被广泛用于建 立基因文库、获得目的基因等工作。在基因工程中起作用。 解旋酶： 是一类解开氢键的酶，由水解 ATP 来供给能量它们常常依赖于单链的存在， 并能识别复制叉的单链结构。在细菌中类似的解旋酶很多，都具有 ATP 酶的活性。大部分 的移动方向是 5 → 3 ，但也有 3 →5 移到的情况， 如 n 蛋白在 φχ174以正链为模板合成复制 形的过程中，就是按 3 →5 移动。在 DNA 复制中起做用。 DNA 限制酶