流式细胞术测定细胞周期.pdfVIP

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  • 2021-11-09 发布于上海
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流式细胞术测定细胞周期 一、实验原理 碘化丙锭( PI)可以与细胞内 DNA 和 RNA 结合 ,采用 RNA 抑制剂将 RNA 消化后 ,通过流式细胞术检测到的与 DNA 结合的 PI 的荧光强度直接反映了细胞 内 DNA 含量的多少。由于细胞周期各时相的 DNA 含量不同 ,通常正常细胞的 G1/G0 期具有二倍体细胞的 DNA 含量 (2N),而 G2/M 期具有四倍体细胞的 DNA 含量 (4N),而 S 期的 DNA 含量介于二倍体和四倍体之间。因此 ,通过流式细胞术 PI 染色法对细胞内 DNA 含量进行检测时 ,可以将细胞周期各时相区分为 G1/G0 期 ,S 期和 G2/M 期,并可通过 Multicycle 软件计算各时相的百分率。值得注意的 是 , PI 不能通过细胞膜完整的细胞 (如活细胞和早期凋亡细胞 ) ,在标本制备时 ,必 须先用乙醇或其他

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