多聚-L-赖氨酸(Poly-L-Lysine)的原理.pdfVIP

多聚 -L- 赖氨酸 (Poly-L-Lysine) 的原理 多聚赖氨酸一般常见的分子量有 70 ，000~150，000 ，150，000~300，000 和 300，000， 分子量越大，黏附力越强，但相对完全溶解较困难。 原理： 多聚赖氨酸溶液是广泛应用的组织切片与玻片黏合剂， 该多聚阳离子分子与组织切片上 的阴离子相互作用会产生较强的黏合力。 培养瓶表面的性质对于细胞培养至关重要， 细胞表 面的糖蛋白 （阴性）易于吸附在亲水性的表面上， 因而细胞培养表面如果有相当含量的阳性 电荷更能促进细胞吸附，这正是运用多聚赖氨酸优化细胞培养表面的重要所在。 应用： 适用组织学，免疫组织化学，冰冻切片， 细胞涂片， 原位杂交等使用的玻片的防脱片处 理，以防实验操作过程中组织掉片。也可用于细胞培养，增加细胞贴壁能力。 溶液配制： 用去离子水溶解，配制成母液备用。保存于 -20 ℃。 玻片处理： 1. 灭菌水稀释聚赖氨酸溶液，一般的使用浓度为 0.01 ％。 2. 将玻片浸在稀释的多聚赖氨酸溶液 5 分钟。注意增加时间不会提高包被效果。 3. 在 60℃烘箱 1 小时干燥，或室温 18-26 ℃过夜干燥待用。 注意： 1. 每 100mL已稀释的多聚赖氨酸溶液要包被的玻片 40-90 张， 超过 90 张片子将 影响其黏合力。 2. 用之前的玻片必须保持清洁。必要时用含 1% HCl 的 70%乙醇溶液来清洗。 3. 释过的多聚赖氨酸溶液要放在 2-8 ℃，至少在 3 个月内是稳定的。 4. 用过的稀释液要过滤，若出现浑浊或长菌要丢弃 5. 多聚赖氨酸浓度可以高一些，吸出来的可以重复利用至少 20 次。 培养瓶处理： 1. 包被培养板或者是培养瓶，一般多聚赖氨酸浓度为 0.01 ％， 2. 准备 100ml 三蒸水，经高压灭菌处理。 3. 0.01%的多聚赖氨酸以 50 微升每平方厘米的量均匀涂于培养底物的表面， 室温 下静置 5min ，吸除多余液体。 4. 加入灭菌水，反复冲洗三次，无菌操作。 5. 处理后无菌晾干备用。 6. 回收后保持无菌的多聚赖氨酸可反复利用，。 连续很多天都是天亮之后才睡觉。别人问我，你晚上不睡觉都在干嘛。我马上回答，写稿啊，书稿还没交呢。但其实，我一个字也没写。而之所以熬夜，也不过是因为心里有牵挂的人和未完 成的事吧。 别人问你怎么还不睡，你说不困。其实熬夜很困，打个哈欠都会有眼泪流出来，只是心中一直有所期待，有所牵挂。就好像下一秒就会收到喜欢的人的消息，下一秒就能遇见一个惊喜。 又或者，熬了太久却迟迟得不到自己想要的结果，渐渐的习惯了孤独。 为什么会熬夜呢，大概是因为白天的自己太理智，太冷漠，好像什么都不在乎。所以有些情绪和思念，心酸和不舍，是要留到深夜独自慢慢消化的。白天的自己和晚上的自己完全不是同 一个人啊，白天口口声声说一定早睡，晚上却从来做不到。像失忆一样拿命熬夜，白天开开心心无忧无虑，晚上却忧郁的不行。白天觉得我最牛逼，晚上却变成世界第一大傻逼。 总觉得幸福的人是不用熬夜的，每天都有规律的生活，爱的人就躺在身边，现在过的是想要的生活，手里牵的是喜欢的人。 昨天有人问我，为什么你晚上不睡觉。 我想了很久，已经两三年没有在两点之前入睡过了。但我也说不清为什么，那个人突然给我发了一段话，我突然觉得，这是我熬夜的原因，也是很多人熬夜的原因。 你总是习惯熬夜，然后我也故意很晚都不睡。装作是和你一样睡不着，这样就可以和你聊很久，可是你都不知道其实我要困死了。后来你走了，熬夜的习惯却怎么都改不掉。 说片面点是熬夜，说实在