人IL-17AF定量检测试剂盒(ELISA)说明书.docxVIP

精选 精选 人 人 IL-17AF 定量检测试剂盒（ ELISA）说明书 【货 号】YKE-1434 【产品名称】 通用名称：人 IL-17AF 定量检测试剂盒（ ELISA） 英文名称： Human IL-17AF 【包装规格】 96 人份/ 盒 【预期用途】 仅供科研使用，定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中 IL-17AF 的浓度。 【检验原理】 本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。 特异性抗人 IL-17AF 单克隆抗体预包被在高亲和力的酶标板上。 酶标板孔中加入标准品、 待测样本和生物素化的检测抗体， 经过孵育， 样本中存在的 IL-17AF 与固相抗体和检测抗体结合。 洗涤 去 除 未 结 合 的 物 质 后 ， 加 入 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 的 链 霉 亲 和 素(streptavidin-HRP) 。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中 IL-17AF 的浓度成正比。加入终止液终止反应，在 450 nm波长( 参考波长 570 -630 nm) 测定吸光度值。 注意：使用前请检查试剂盒中试剂的标签和数量与表格是否一致【样本要求】 注意：使用前请检查试剂盒中试剂的标签和数量与表格是否一致 【样本要求】 样本类型和采集 组分 规格 数量 包被微孔板 96T 1 板 标准品 4000pg/mL 2 管 抗体 80uL 1 管 辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素 150uL 1 管 10×检测缓冲液 5mL 1 瓶 标准品稀释液 5mL 1 瓶 TMB显色液 10mL 1 瓶 TMB终止液 10mL 1 瓶 洗涤缓冲液 (20X) 30ml 1 瓶 封板膜 4 张 细胞培养上清 300 g 离心 10 分钟去除沉淀物，即刻检测 , 或者分装， -20 ℃以下贮存。血清样本 分离管分离血清。在 1000 g 离心之前，使血样凝集 30 分钟。吸取血清样本之后即刻检测，或 者分装， -20 ℃以下贮存。 血浆样本 EDTA、枸橼酸钠或肝素抗凝收集血浆样本。 1000 g 离心 3 0 分钟收集样本。即刻检测，或者 分装， -20 ℃以下贮存。 本试剂盒可能适用于其它生物学样本。 细胞培养上清、血清和血浆已经过验证。 注意：检测前，样本中可见的沉淀必须去除。不要使用严重溶血或高血脂 的样本。 样本应分装并贮存于 -20 ℃，以避免人 IL-6 活性的丢失。如果在 24 小时内检测，样本可以 存 放 在 2 - 8℃。 避免样本的反复冻融。在检测前， 冷冻样本应该缓慢地恢复至室温，轻柔地混匀。 样本保存和稳定性 样本保存和稳定性 样本在 2-8 ℃条件下， 可以储存 72h，或者在 - 20℃储存 6 个月。样本收集后， 不是一次检测完， 请按一次用量分装冻存， 避免反复冻融， 使用时在室温下解冻， 确保样品均匀充分解冻。 【检验方法】 试剂准备 检测前请将所有的试剂、 样本恢复至室温。 如果浓缩的试剂出现结晶， 37℃ 温浴，直至结晶全部溶解。 1×洗液 吸取 20 ×浓缩洗液 30 ml 至 1 L 的量筒，加蒸馏水或去离子水至 600 ml， 轻轻混匀， 避免泡 沫。 转移至干净瓶内。 2 - 25℃贮存，1×洗液可稳定 30 天。 1×检测缓冲液 吸取 10 ×浓缩检测缓冲液 5 ml 至 100 ml 量筒，加蒸馏水或去离子水至 50 ml，轻轻混匀，避 免泡沫。 2 - 8℃贮存， 1×检测缓冲液可稳定保存 30 天。 检测抗体 稀释前充分混匀。 根据标准品和待测样本的数量， 用 1 ×检测缓冲液按 1 ：100 稀释浓缩的检 测抗体。 注意：请在 30 分钟内使用稀释后的检测抗体。 辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素 稀释前充分混匀。 根据标准品和待测样本的数量， 用 1 ×检测缓冲液按 1 ： 100 稀释浓缩的辣根过氧化物酶标记的 链霉亲和素。 注意：请在 30 分钟内使用稀释后的辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素。 样本稀释 如果样本需要稀释，请用试剂盒提供的 1 ×检测缓冲液稀释血清 / 血浆样本，用细胞培养基稀释 细胞培养上清。 人 IL-17AF 标准品 用蒸馏水或去离子水重溶 人 IL-17AF 标准品， 重溶体积标注在 人 IL-17AF 标准品的标签上。 轻柔 地涡旋震荡， 确保充分混匀， 重溶后标准品的浓度为4000 pg/ml 。重溶后静置 10 - 30 分钟。稀释 前充分混匀。 请使用聚丙烯管进行标准品稀释。 标准曲线制作血清 / 血浆样本标准曲线的制作： 取 250 μl 浓缩的人 IL-17AF 标准品，加入 250 μl 标准品稀释液， 作为标准曲线的最高浓度 (2000 pg/ml) 。在每一个试管中加入 250 μl