干扰素制备的工艺流程.ppt

干扰素的制备流程; 干扰素; ;;;目的基因的分离与获得; ;;;。 ;;提取重组质粒③;提取重组质粒④;（一）聚乙二醇沉淀法提取质粒DNA 1)将核酸溶液所得转入15mlCorex管中，再加3ml用冰预冷的5mo1/L LiCl溶液， 充分混匀，用合适转头于4 ℃下以10000转/分离心I0分钟。LiCI可沉淀高分子RNA。 2)将上清转移到另一30mlCorex管内，加等量的异丙醇，充分混匀，用SorvallSS34转头(或与其相当的转尖)于室温以10000转/分离心10分钟，回收沉淀的核酸。 3)小心去掉上清，敞开管口，将管倒置以使最后残留的液滴流尽。于室温用70%乙醇洗涤沉淀及管壁，流尽乙醇，用与真空装置相连的巴其德吸管吸去附于管壁的所有液滴，敞开管口并将管倒置，在纸巾上放置几分钟，以使最后残余的痕量乙醇蒸发殆尽。 4)用500μl含无DNA酶的胰RNA酶(20μg/ml)的TE(pH8.0)溶解沉淀,将溶液转到???微量离心管中，于室温放置30分钟。 5)加500μl含13%(w/v)聚乙二醇(PEG8000)的1.6mol/LNaCI，充分混合，用微量离心机于4 ℃以12000g离心5分钟，以回收质粒DNA。  ;;;目的基因