兽医公共卫生学07邮箱2009本科公共卫生.pptxVIP

食源性病原菌基因组的提取 浙江大学动物科学学院 方维焕，温贵兰，陈健舜 内容安排 12月1日 食源性病原菌基因组模板的提取 12月8日 食源性病原菌分子鉴定 12月15日 食源性病原菌分子分型 一. 基因组提取方法分类 二. 煮沸法 - 所需材料 过夜培养菌液 (单增李斯特菌10403S、H4) 灭菌双蒸水 TZ (Triton-X 100+NaN3+Tris，pH8.0) 50 μL、1 mL移液器 EP管 二. 煮沸法 - 操作步骤 细菌过夜培养。 吸取1.5mL至EP管，离心12000rpm×1min。 弃去上清，用500μL双蒸水洗涤，离心12000rpm×1min。 弃去上清， 用30μL双蒸水重悬，再加入30μL TZ 。 -20℃静置45min。 沸水浴作用10min。 冰浴10min。 离心12000rpm×1min，吸取上清至新EP管-20℃保存。 总时长：约80min。 三. 浓度测定 Nanodrop： 浓度； A260/A280； A260/A230。