基因工程的基本操作步骤.ppt

基因工程的基本操作程序;1、基因工程包括哪些步骤？;3;基因工程的基本操作程序; 主要是指编码蛋白质的基因;（二）获取目的基因的方法;1、从基因文库中直接获取;（2）基因文库的建立方法;某种生物的单链mRNA;PCR技术—多聚酶链式反应;利用PCR技术扩增目的基因;5’;蛋白质的氨基酸序列;—— 核心;基因表达载体的构建;编码区;编码区;基因表达载体的组成：;1、下列属于获取目的基因的方法的是 ①利用mRNA反转录形成 ②从基因组文库中提取 ③从受体细胞中提取 ④利用PCR技术 ⑤利用DNA转录 ⑥人工合成 A.①②③⑤ B.①②⑤⑥ C.①②③④ D.①②④⑥;2、1997年，科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组，并且在大肠杆菌中表达成功。请据右下图回答问题。 (1)此图表示的是采取__________合成基因的方法获取__________基因的过程。 (2) 图中①DNA是以为_________ _________ 模板，形成单链DNA，在酶的作用下合成双链DNA，从而获得了所需要的目的基因。;(3) 图中③代表 　， 它往往含 　基因，以便对 目的基因的检测。;;将目的基因导入植物细胞的方法;土壤农杆菌转化法示意图;将目的基因导入动物细胞的方法;将目的基因导入微生物细胞方法;四、目的基因的检测与鉴定; 不能，受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达。;　　多细胞生物的检测，将每个受体细胞单独培养并诱导发育成完整个体，检测这些个体是否摄入目的基因，摄入的基因是否表达（是否表现出相应的性状）。淘汰无变化的个体，保留有相应变化的个体进一步培养、研究。;3．（2010江苏高考，27题，8分）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题： ;（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越 。 （3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是 。 （4）与只使用EcoR I相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。 （5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 酶。 （6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。 （7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在 的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。