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微生物检测基础 ;一．什么是微生物？;病毒;细菌;5;酵母菌 ;霉菌 ;蓝细菌（蓝绿藻） ;单细胞，介于细菌与病毒之间的一类原始而小型的原核微生物。 ;微细藻类;原生动物 ;二．微生物的特性 ;1．种类多 ;2．分布广 ;3．繁殖快 ;4．易变异 ;三．常见微生物的  形态结构 ;18;19;20;21;22;23;24;25;26;27;四．实验室微生物的培养 ; 实验室中微生物生长（培养）在液体或固体培养基中。细菌生长的培养基应含所有生长的基本需求：水分、碳源、氮源、无机盐及生长因子等营养物质。; 原养型不需要在培养基中添加另外的成分，而营养缺陷型需要添加生长因子如氨基酸、维生素和含氮碱基。所用的培养基可以是所有成分及含量确切知道的限定培养基（合成培养基）和含有不确定营养物混合物的天然培养基。; 琼脂（洋菜）是用来固化液体培养基的。选择培养基或鉴定培养基是用来检测特定微生物类群的。;生长培养基 ;培养基的性质取决于微生物的天然环境和微生物生长的营养要求。 分离大量微生物用液体培养基， 固体培养基用于个别细菌的分离和保存。 ;限定培养基或合成培养基 ; 天然培养基 天然培养基含有不确定的成分如蛋白胨（大豆粉酶消化液）和提供足够营养成分的酵母提取物（氨基酸、维生素、糖和碱基），适合广泛范围微生物的生长。 天然培养基如营养肉汤（NB）和胰胨、豆胨肉汤（TSB）是实验室中常规用的细菌培养基，特别对生长要求还未确定的细菌生长使用。 ; 常用血液作培养基的附加成分分离人类病原菌，由于它提供许多难养的人类病原菌生长的基本营养，如链球菌。特殊的选择培养基和鉴别培养基经常用于分离特定的微生物类群，尤其在医院的实验室中。 ;选择培养基与鉴别培养基 设计这些培养基是为选择特定类群的微生物或鉴别两种菌种时用。 选择培养基含有抑制非目的细菌生长的成分，鉴别培养基是添加某种营养物或／和化学物质，促进所要的微生物生长，使在鉴别培养基平板上两种不同的微生物的菌落可以区分开来。 ;生长的环境条件 ;温度;氧浓度 ;pH值 ;水活度 ;五．微生物的生长 ;1．细菌以二等分裂方式（1→2→4）分裂，细菌的生长为指数生长。群体细胞数目加倍所需的时间为倍增时间（td）。 ;细菌典型生长曲线;2．真菌的生长 ;真菌生长的各个时期 ;3．微生物生长的测定方法 ;(1)活菌计数法 ;（2）计算器法;（3）比浊法;六．微生物生长的控制 ;1．灭菌方法 ;54;55;56;自动高压蒸汽灭菌锅;2．消毒剂与防腐剂 ;59;60; 防腐剂 ;七．微生物的观察 ;1．细菌的染色 ;细菌染色所用的染料，按其所带电荷状态分，碱性染料和酸性染料。 碱性染料：结晶紫、龙胆紫、碱性品红（复红）、蕃红、美蓝、甲基紫、中性红、孔雀绿等。 酸性染料：酸性品红、刚果红、曙红等。在通常的培养条件下细菌带负电，碱性染料带正电荷，易与菌体的酸性物质（带负电荷的细胞成分有核酸和酸性多糖）牢固地结合。所以，多采用碱性染料染色。 只有在分枝杆菌属（Myoobaoterium）或诺卡氏菌属(Macardia)中的一些菌才能用酸性染料（石碳酸品红）染色（抗酸性染色）。 ;方法 简单染色和复合染色法。 简单（单）染色法只用一种染料染菌体，目的仅为增加反差，便于观察。 复合（杂）染色法是用两种染料染色，以区别不同细菌的革兰氏染色反应或抗酸性染色反应；或将菌体和某一结构染成不同颜色，便于观察。 ;革兰氏染色法 ;革兰氏染色法;（1）用接种环取少量细菌在干净的载玻片上涂布、固定。 （2）用草酸铵结晶紫染色。 （3）用弱酸性媒剂碘―碘化钾溶液媒染。 （4）用中性脱色剂，如乙醇或丙酮脱色，能被脱色的叫革兰氏阴性菌，其菌体无色；不能被脱色的叫革兰氏阳性菌，其菌体呈紫色。 （5）以上四步已能区分两大类细菌，为了使革兰氏阴性菌易被观察，还需用与草酸铵结晶紫颜色鲜明对比的品红或蕃红复染。经脱色的革兰氏阴性菌被染上红色，没有脱色的革兰氏阳性菌染不上红色，仍呈紫色。 ;八．微生物的分离 ;细菌的纯培养 ; 划线 划线 烧接种环 ? ? ? 烧接种环 灭菌通过本生煤气灯 培养后的 单个? 菌落?