毛细管电泳—安培检测技术在电活性与非电活性物质分析中的应用研究.pdfVIP

毛细管电泳 — 安培检测技术在电活性与非电活性物质分析中的应用 研究 【摘要】：毛细管电泳 (CapillaryElectrophoresis,CE),又叫高效毛细管电 泳 (HighPerformanceCapillaryElectrophoresis,HPCE),是以毛细管为分 离通道 ,以高压直流电场为驱动力 ,根据样品中各组分间迁移速率的差 异而实现分离的一种分离分析技术。在 80 年代中后期 ,毛细管电泳的 应用得到了飞速发展。到目前为止 ,毛细管电泳已被广泛用于分离无 机离子、中性分子、生物大分子等 ,涉及分析化学、食品化学、法医 化学、临床化学、有机化学、药物化学、 分子生物学等诸多学科领域。 但毛细管电泳纳升级的进样量 ,以及微小的内径对检测器提出了特殊 的要求。电化学检测技术 (ED),特别是其中的安培检测技术 (AD), 因其 较低的检测限 ,较高的灵敏度 ,较宽的线性范围和较低的成本在分析领 域得到了广泛的应用。本论文探讨了毛细管电泳 — 安培检测技术 (CE-AD) 在中药分析、 食品分析、 生化分析中的应用研究 ,主要内容为 以下三部分：第一部分绪论概述毛细管电泳的基本原理、分离机理、 分离模式、分离行为、发展趋势和应用现状 ,并简要介绍本论文的目 的和意义。第二部分毛细管电泳 — 安培检测技术在电活性物质分析中 的应用研究第一章夏枯草中活性成分的毛细管电泳 —安培检测方法 研究本实验采用毛细管区带电泳 — 安培检测法同时测定了夏枯草中 的 6 种活性成分 —芦丁、伞形花内酯、金丝桃苷、对香豆酸、迷迭香 酸和咖啡酸的含量。采用自组装的毛细管区带电泳 — 安培检测系 统 ,75cm 长熔融石英毛细管 ( 内径 25 μm,外径 360 μm),直径 300 μm的碳 圆盘工作电极 ,工作电极电位为 +950mV(vs.SCE),分离电压为 16kV,运 行液为 60mmol/L 的硼酸盐缓冲溶液 (pH9.0),进样时间为 8s。在优化 条件下 ,6 种组分的浓度和峰电流在 2-3 个数量级范围内呈良好线性关 系 ,最低检测限范围 (S/N=3)为 1.42x10-8-3.75x10-7g ／mL 。该法成功 地将夏枯草中的上述 6 种活性成分进行分离和检测 ,得到了理想的结 果。第二章香椿叶中活性成分含量随季节变化的毛细管电泳 —安培检 测方法研究本实验采用毛细管电泳 — 安培检测法测定了香椿叶中四 种活性成分 (表儿酸、莨菪亭、槲皮素和没食子酸 )在四月份、六月份 和八月份含量的变化。考察了诸如电极电势、缓冲液酸度和浓度、分 离电压等实验参数对分离检测的影响 ,得到了最佳分离条件：采用直 径 300 μm的碳圆盘电极作检测电极 ,检测电极电位为 +950mV(vs.SCE), 分离电压为 16kV,运行液为 40mmol/L(pH9.0) 的硼酸盐缓冲液 ,分离在 75cm 长熔融石英毛细管 ( 内径 25 μm,外径 360 μm)内完成。在上述优化 条件下 ,被测组分得到了较好的分离