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高性能膜吸附制备表面引发AGET
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高性能膜吸附制备外表引发AGET ATRP中存在的溶解氧和低催化剂浓度
摘要:这种奉献,介绍了外表引发的AGET 〔电子转移所产生的激活〕第一次使用ATRP 〔原子转移自由基聚合〕准备高容量的吸附膜生物别离。目前的进步极大地简化了克制膜的开展需要专门的催化剂,处理和解决方案去充氧标准要求的步骤原子转移自由基聚合方法。此外,它使修改催化剂浓度ppm级。基纤维素膜外表引发AGET ATRP是用来准备胺阴离子交换膜。没有人采取预防措施,从系统中删除氧和催化剂浓度分别为50-200 PPM 。一组实验进展了优化摩尔量复原剂使用的配方。催化剂浓度和反响时间作为独立变量来研究外表改性膜蛋白结合能力的影响。绑定和洗脱测量吸附膜床来衡量动态的蛋白质结合能力,证明膜的极为有利的运输性能床。
1 简介
膜吸附色谱法是一种高通量替代树脂柱层析蛋白纯化[1-8] 。尽管膜的诸多优点色谱仪,它并没有得到落实广泛的初始由于历史上的低体积蛋白捕获步骤膜的能力[ 1,4,5,8 ]。因此,开展膜具有较高的结合能力,是一个活泼的研究领域。
到膜建筑涂料吸附功能[ 9-12 ]或接枝聚合[ 13-19 ]是一个战略,以增加结合能力。虽然接枝聚合产生一个大结合位点的数量,需要控制修改防止毛孔阻塞和阻碍了大量吸附运输化合物,如蛋白质。外表引发ATRP允许相对罚款及独立的控制链密度和程度从外表接枝聚合物链的聚合基膜[ 13-17 ] 。 [ 14,15,19 ]已经证明我们最近的工作外表引发的诸多机遇和优势ATRP准备膜吸附。
ATRP是一个氧化复原引发聚合反响。反响组成一个复杂的有机金属催化剂催化协调配体的过渡金属。过渡金属易受与氧气或其他氧化剂,从而促进反响较高的氧化状态的金属,不能启动的ATRP的过程。因此,以备外表改性膜一致的性能,预制催化剂被储存在惰性气氛中,和实验考前须知需要保持无氧环境,整个这一进程。从解决方案之前必须撤除溶解氧原子转移自由基聚合的催化剂此外。催化剂的制备,也必须在去含氧溶剂和无氧环境下防止了催化剂的氧化。因此,工艺催化剂处理可以是具有挑战性,并有可能成为不切实际在工业规模上。
目前的进步,从而克制了这些障碍形成在原位和消除溶解氧活性催化剂另外一个到解决方案中的复原剂。我们使用surfaceinitiated AGET〔电子转移所产生的激活〕ATRP,最近才开发Matyjaszewski和他的同事[ 20-23 ] 。在此方法中,活化催化剂铜〔I〕是〔重新〕产生氧化铜〔II〕由电子转移的形式,采用环保可承受的复原剂如抗坏血酸〔维生素C 〕[ 24]。复原剂可用于就地减铜〔Ⅱ〕为铜〔I〕,而没有在溶液中形成的自由基。AGET ATRP超过传统ATRP的优点是:〔1〕催化剂浓度可显着减少〔下降到5-100 PPM 〕自启动的催化剂,可以regeneratedcontinuously [ 22 ] 。〔2〕聚合可以开场使用的氧化稳定的铜〔II〕物种。〔3〕它可以容忍顶空氧气在反响室,因此,并不需要脱氧反响混合物或专门的筹备设备。由于没有特别去充氧步骤之前,需要聚合,修改程序大大简化。
这研究宗旨将设计膜吸附器开展的[25]一个外表被创始的AGET ATRP协议。从根本的纤维素膜的外表被创始的AGET ATRP在被密封的小瓶被执行阴离子交换膜为膜色谱法做准备。 防范措施未被采取从系统取消氧气,并且ppm级使用了催化剂含量。 实验装置被执行优选用于公式化脱氧剂的槽牙相当数量。花了催化剂含量和聚化时间,独立变量学习对外表修改正的膜的蛋白质粘合能力的作用。束缚和洗脱测量是做以一张吸附膜床测量动态蛋白质粘合能力和展示高度有利膜床的输运性质。
2 实验
材料
m厚度、47 mm直径和1.0 m平均有效的毛孔直径从Whatman,Inc.被购置了。 以下化学制品和溶剂从斯格码Aldrich在wt.%被购置了,当纯洁被给:从迟钝的血清的白蛋白 (进一步被净化的分数v,~99%,~先生66 kDa),L抗坏血症酸( 99%),2-bromoisobutyryl溴化物(2围嘴,98%),铜(II)氯化物(99.999%),2 (dimethylamino)乙基异丁烯酸(DMAEMA, 98%),无水的对氨基苯甲酸二( ≥99.5%), 1,1,4,7,10,10- hexamethyltriethylenetetramine (HMTETA,97%),盐酸(HCl,ACS试剂,37%),甲醇(≥99.9%),中性被激活的氧化铝,2丙醇(≥99.8%),氯化钠(NaCl, 9
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