时间分辨荧光免疫技术.ppt

时间分辨荧光免疫技术;问 题;时间分辨荧光免疫 （TrFIA）（Time-Resoled Fluoroimmunoassay）;定 义;发展历程;厂 家;标识物为含有独特荧光特征稀土金属---镧系元素;;时间分辨;经过时间延迟, 将特异性荧光与非特异性荧光 分辨开来, 使本底达成0;Stokes位移;利用镧系元素光谱特点, 将发射荧光与激发荧光分辨开来, 零本底又一保障;稀土离子激发光、发射光和Stokes位移 ;解离增强技术;时间分辨荧光免疫原理;时间分辨荧光免疫原理图（Time-resolved Fluorescence Immunoassay）;乙肝“两对半” TRFIA定量检???原理示意图;乙肝表面抗原免疫反应图 （时间分辨荧光法）;乙肝表面抗体免疫反应图 （时间分辨荧光法）;乙肝ｅ抗原免疫反应图 （时间分辨荧光法）;乙肝ｅ抗体免疫反应图（时间分辨荧光法）;乙肝关键抗体免疫反应图 （时间分辨荧光法）;时间分辨荧光免疫试剂种类;时间分辨荧光免疫分析与其它免疫学方法比较;标识免疫学发展历程;;多种免疫方法学比较;放射性免疫分析法（RIA）---标识物: 125I;酶免疫分析法（ELISA ） ---标识物: HRP(辣根过氧化物酶）;化学发光免疫分析法（CLIA） ---标识物: 化学发光物质（鲁米诺）;电化学发光免疫分析（ECL） ---标识物: 三联吡啶钌;TRFIA在乙肝“两对半”定量检测应用;一、提升了检测灵敏度 时间分辨荧光法（TRFIA）检测HBsAg灵敏度可达成0.2ng/ml, 而酶免法（ELISA）检测HBsAg灵敏度是2ng/ml。 缩短了急性乙肝检测“窗口期”;（1）定量分析HBsAg和HBsAb浓度改变, 能够预见急性乙肝是否处于恢复期 如HBsAg浓度降低, HBsAb逐步升高, 说明病情正向恢复期发展反之。反之, HBsAg浓度处于高水平或上升, 而HBsAb处于低水平, 则轻易发展为慢性乙肝或携带者。;（3）HBcAb浓度高低能够反应病毒感染状态 1、乙肝急性感染常为高滴度HBcAb, 恢复期浓度下降, 慢性乙肝HBcAb呈连续高浓度。 2、低浓度HBcAb通常为恢复期或既往感染。;三、乙肝疫苗接种 HBsAb是一个真正意义保护性抗体, 其定量检测能够对其含有免疫力做出正确评价, 对乙肝预防起到监督作用。;;四、HBV血清学标志物与HBV-DNA关系 血清学标志物 反应机体对病毒免疫状态, 病程, 判定病情, 不能完全反应病毒在体内复制情况 HBV-DNA 1、真实反应病毒在体内复制水平, 观察药品疗效 2、部分“小三阳”及低水平病毒复制时出现阴性 3、不能反应机体免疫状态和病情;血清HBV-DNA荧光定量PCR测定能够直接反应病毒数量, 病毒复制情况, 含有很多临床应用价值, 但不能完全反应病毒复制静息期肝细胞内HBV病毒状态;时间分辨法检测“乙肝两对半”意义;NCU/ml单位起源;半自动 ANYTEST2000;;谢 谢!