第04章分析方法验证new.pptx

药品检验工作的基本程序取样鉴别检查含量测定写出检验报告第四章 药物定量分析与分析方法验证一.定量分析样品的前处理方法二.定量分析方法的特点 三.药物分析方法的验证四.生物样品分析方法的基本要求第一节 定量分析样品的前处理方法一、概述乙烯型卤和芳卤含卤素药物C—X烯丙型卤和苄卤卤代烷型第一节 定量分析样品的前处理方法六氯对二甲苯三氯叔丁醇碘他拉酸泛影酸第一节 定量分析样品的前处理方法配位滴定法氧化还原滴定法直接测定不经有机破坏碱水解酸水解水解后测定经还原分解后测定湿法破坏——凯氏定氮法经有机破坏高温灼烧法氧瓶燃烧法干法破坏(一)、直接测定法适用范围：金属原子不直接于碳原子相连或某些C-M键结合不牢固的有机金属药物。 葡萄糖酸钙 EDTA配位滴定 富马酸亚铁 邻二氮菲-硫酸铈滴定 葡萄酸锑钠 间接碘量法(二)、经水解后测定法三氯叔丁醇1、碱水解法适用范围：含卤素有机药物结构中卤素原子结合不牢固的药物。银量法返滴定2、酸水解法EDTA配位滴定(三)、经还原分解后测定法适用范围：碘原子直接与芳环连接的含碘有机化合物。三、经有机破坏的分析方法(一)湿法破坏 含氮、硫、硫柳汞、氯化钠的生物制品、含氮有机合成药物测定的前处理和生物制品中金属元素测定时生物基质的去除。 H2SO4-HNO3 H2SO4-HClO4 H2SO4-H2SO4 HNO3-KMnO4——凯氏定氮法测定含有氨基和酰胺结构的药物结构分解剂/消化剂辅助分解剂硫酸凯氏烧瓶硫酸滴定空白校正碱液硼酸(吸收液)甲基红-溴甲酚绿指示剂K2SO4(提高消解温度)CuSO4(加快消解速度)(二)干法破坏1.高温灼烧法用于含卤素、含磷药物和药物中砷盐的检查。常加入无水碳酸钠、硝酸镁、氢氧化钙、氧化锌等辅助灰化。2.氧瓶燃烧法 系指将含有待测元素的有机药物置于充满氧气的密闭的密闭的燃烧瓶中充分燃烧，使有机结构部分彻底分解为CO2和H2O，待测元素根据电负性的不同转化为不同价态的氧化物，被吸收于适当的吸收液中，再根据其性质和存在方式选择方法进行分析。第一节 定量分析样品的前处理方法第二节 定量分析方法的特点一、容量分析方法1.滴定度每1ml规定浓度的滴定液所相当的被测药物浓度。被测药物滴定液第二节 定量分析方法的特点二、光谱分析法(一)紫外-可见分光光度法 仪器校正 空白溶剂校正 吸收峰波长确定 A－(0.3~0.7)第二节 定量分析方法的特点含量测定方法1.对照品比较法原料药第二节 定量分析方法的特点2.吸收系数法习题一 维生素B2含量测定 取本品75mg，精密称定，置烧杯中，加冰醋酸1ml与水75ml，加热溶解后，加水稀释，放冷，移置500ml量瓶中，加水稀释至刻度，混匀；精密量取10ml，置100ml量瓶中，加1.4%醋酸钠溶液7ml，并用水稀释至刻度，摇匀，照分光光度法在444nm的波长处测吸收度，按维生素B2的吸收系数 为323计算第二节 定量分析方法的特点3.计算分光光度法4.比色法(二)荧光分析法特点： 灵敏度高，可达10-10～10-12g/ml 要求低浓度下测定 须做空白测定 荧光弱的药物可衍生化后测定(三)色谱分析法1.HPLC示例一 炔诺酮的含量测定 照高效液相色谱法(附录ⅤD测定)色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(65:35)为流动相，检测波长为244nm。理论塔板数按炔诺酮峰计算不低于1500，炔诺酮峰与内标物质峰的分离度及主成分峰后一杂质峰与主成分峰的分离度均应符合要求。第二节 定量分析方法的特点测定法 取本品约25mg，精密称定，置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取此溶液2ml与内标溶液3ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，取20μl注入液相色谱仪，记录色谱仪，记录色谱图；另取炔诺酮对照品适量，精密称定，同法测定。按内标法以峰面积计算，即得。100%. Int. (%)50%Rel0%0.20.61.01.41.82.22.63.0Time, min定量分析的方法(外标法)定量分析的方法(内标法)100%. Int. (%)50%Rel0%0.20.61.01.41.82.22.63.0Time, min第二节 定量分析方法的特点测定法 取本品约35mg，精密称定，置10ml棕色量瓶中，精密加入内标溶液2ml，用石油醚(30～60°C)溶解并稀释至刻度，摇匀，吸取1μl注入气相色谱仪，测定，即得。 本品含α-蒎烯(C10H16)不得少于70%。第三节 药品分析方法的验证目的： 证明所采用的分析方法适合于相应的检测要求效能指标： 评价分析方法的尺度 效能指标包括: 精密度, 准确度, 检测限,定量限,选择性,线性与范围, 耐用性一、准确度（accuracy） 系指用该方法测定