组培实验室的设计.ppt

第一章植物组织培养实验室构建 第一节：商业性组织培养实验室和小工厂的设计与主要设备 主要内容： 实验室的设计 仪器设备和器皿用具 在进行植物组织培养工作之前，首先应对工作中需要哪些最基本的设备条件有个全面的了解，以便因地制宜地利用现有房屋，或新建、改建实验室。实验室的大小取决于工作的目的和规模。以工厂化生产为目的，实验室规模太小，则会限制生产，影响效率。在设计组织培养实验室时，应按组织培养程序来没计，避免某些环节倒排，引起日后工作混乱。植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。要做到无菌的条件，需要一定的设备、器材和用具，同时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。 一、实验室设计 组培实验室设计原则： 保证无菌操作，达到工作方便，防止污染。 组培实验室组成： 标准组织培养室包括: 洗涤室（区） 制备室（区） 灭菌室（区） 储放室（区） 操作室（区） 培养室（区） 观察室（区） 药品室（区） ▼ 可以根据自己的实际条件进行合并 准备室：完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、配制、培养基分装等。主要设备： 药品柜、防尘橱（放置培养容器）、冰箱、天平、蒸馏水器、酸度计及常用的培养基配制用玻璃仪器. 洗涤、灭菌室：完成各种器具的洗涤、干燥、保存、培养基的灭菌等。主要设备：水池、操作台、高压灭菌锅、干燥灭菌器（如烘箱）等。 卧式灭菌锅 无菌操作室（接种室）： 主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序。主要设备：紫外光源、超净工作台、消毒器、酒精灯、接种器械（接种镊子、剪刀、解剖刀、接种针）等。 接种室宜小不宜大，一般7～8平米，要求地面、天花板及四壁尽可能密闭光滑，易于清洁和消毒。配置拉动门，以减少开关门时的空气扰动。 要求干爽安静，清洁明亮。在适当位置吊装1～2盏紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。最好安装一小型空调，使室温可控，这样可使门窗紧闭，减少与外界空气对流。 接种室应设有缓冲问，面积1m2为宜。进入无菌操作室前在此更衣换鞋，以减少进出时带入接种室杂菌。缓冲间最好也安一盏紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。 超静工作台 酸度计 培养室： 培养室是将接种的材料进行培养生长的场所。其大小可根据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定。其设计以充分利用空间和节省能源为原则。高度比培养架略高为宜，周围墙壁要求有绝热防火的性能。主要设备：培养架（控温控光控湿）、摇床、培养箱、紫外光源等。培养材料放在由金属制成培养架上培养。培养架一般设5层，最低一层离地高约lOcm，其他每层间隔30cm左右，培养架高1．7m左右。其长度根据日光灯长度而设计， 如采用40W日光灯，则长I．3m，30W的长lm，宽度一般为60cm。培养室最重要的因子是温度，一般保持在20—27℃左右，具备产热装置，并安装窗式或立式空调机。由于热带植物和寒带植物等不同种类要求不同温度，最好不同种类有不同的培养室。室内湿度也要求恒定，相对湿度以保持在70%～80%为好，可安装加湿器。控制光照时间可安装定时开关钟，一般需要每天光照10-16h，也有的需要连续照明。现代组培实验室大多设计为采用天然太阳光照作为主要能源，这样不但可以节省能源，而且组培苗接受太阳光生长良好，驯化易成活。在阴雨天可用灯光作补充。 细胞学实验室 该室用于对培养物的观察分析与培养物的计数等。主要设备：双筒实体显微镜、显微镜、倒置显微镜等。小型仪器设备有：分注器、血球计数器、移液枪、过滤灭菌器、电炉等加热器具、磁力搅拌器、低速台式离心机等。 显微镜 显微镜 玻璃器皿及用具 玻璃器皿 培养用的：试管、三角瓶、培养皿等； 显微镜下观察用的：细胞微室、载玻片、培养皿等。 微孔过滤器（细胞过滤器） ：激素用于灭菌。 一般用石棉滤膜 第二节：培养基及其配制 主要内容： 培养基的成分 培养基的种类、配方及其特点 培养基的配制 1、培养基母液的配制 2、培养基的配制 一、培养基的成分 大量元素 微量元素 氨基酸和有机附加物 植物激素（植物生长调节剂） 维生素类 凝固剂 大量元素（以Ms培养基为例） 序号 化学式 化学名称 用量mg/l 1 KNO3 硝酸钾 1900 2 NH4NO3 硝酸铵 1650 3 KH2PO4 磷酸二氢钾 170 4 MgSO4.7H2O 硫酸镁 370 5 CaCL2.4H2O 二氯化钙 440 微量元素（以MS培养基为例） 序号 化学名称 化学式 用量（mg/l) 1 碘化钾 KI 0.83 2 硼酸 H3BO3 6.2 3 硫酸锰 MnSO4.4H2O 22.3 4 硫酸锌 ZnSO4.7H2O 8