30实验三十 质粒DNA的小量快速提取.pdfVIP

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  • 2021-11-22 发布于湖北
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实验三十 实验三十 质粒DNA的小量快速提取(碱裂解法) Minipreparation of Plasmid DNA (Alkaline Lysis Method) 实验目的 • 掌握碱裂解法抽提质粒的原理、步骤及各 主要试剂的作用。 质粒 (plasmid) 特点 能在宿主细胞内独立自主复制;带 有某些遗传信息, 会赋予宿主细胞一些遗传 性状。 载体的选择标准 • 能自主复制; • 有克隆位点(外源DNA插入点),常具有多个 单一酶切位点,称为多克隆位点; • 具有两个以上的遗传标记,便于重组体的筛选 和鉴定; • 分子量小,以容纳较大的外源DNA。 质粒的复制型 质粒在细胞内的复制一般有两种类型: – 严谨型(Stringent control) :只在细胞周期的一定 阶段进行复制,当细胞染色体复制一次时,质粒也 复制一次,每个细胞内只有1~2个质粒 – 松弛型(Rela

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