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- 2021-11-22 发布于湖北
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实验三十
实验三十
质粒DNA的小量快速提取(碱裂解法)
Minipreparation of Plasmid DNA (Alkaline
Lysis Method)
实验目的
• 掌握碱裂解法抽提质粒的原理、步骤及各
主要试剂的作用。
质粒 (plasmid)
特点
能在宿主细胞内独立自主复制;带
有某些遗传信息, 会赋予宿主细胞一些遗传
性状。
载体的选择标准
• 能自主复制;
• 有克隆位点(外源DNA插入点),常具有多个
单一酶切位点,称为多克隆位点;
• 具有两个以上的遗传标记,便于重组体的筛选
和鉴定;
• 分子量小,以容纳较大的外源DNA。
质粒的复制型
质粒在细胞内的复制一般有两种类型:
– 严谨型(Stringent control) :只在细胞周期的一定
阶段进行复制,当细胞染色体复制一次时,质粒也
复制一次,每个细胞内只有1~2个质粒
– 松弛型(Rela
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