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免疫细胞分型常见标志物大串烧(一)——T 细胞分型标志物
免疫分型( immunophenotyping )是指根据存在于细胞表面、核或细胞质中的标记物或
抗原的类型, 利用基于抗体的对异质细胞群进行分析, 以鉴定多种目标细胞群的存在及比例。
通过使用特异性识别不同细胞类型标记物或抗原的抗体, 从而帮助鉴定细胞的谱系。 例如肿
瘤标志物的检测、浸润免疫细胞的分析、白血病的诊断等。免疫分型可以利用组织切片
鲜或固定组织 ) 通过免疫组化方法以及利用细胞悬液通过流式细胞术进行分析。
流式细胞术可以说是用于探测人类免疫表型的首选技术, 特别是由于它可以在诸如血液的复
杂混合物中通过测量许多单个细胞上的多个参数, 从而鉴定和分析包括稀有亚群在内的许多
细胞亚群。 并且由于可用的抗体试剂的扩大和实验方案的不断调整, 流式细胞术不仅可用于
评估细胞表面蛋白的表达,还可以用于评估胞内蛋白的表达或修饰水平以及细胞因子的水
平。
使用细胞表面标记的特定组合对免疫细胞亚群进行定义是一个不断发展的过程, 特别是那些
高频研究的细胞类型。 这些类型包括调节性 T 细胞 (Treg) 分泌、 IL-17 的 T 辅助细胞 (Th17) 、
树突状细胞 (DC) 和自然杀伤细胞 (NK) 。尽管新标记的发现和新的细胞子集将在未来一段时
间内持续下去, 然而, 我们还是希望细胞免疫学领域具有足够的成熟程度, 以达到对大多数
共同研究的免疫细胞亚群的定义达成共识。 换句话说, 应当能够定义一种相对稳定的标记集
合,其描绘 T 细胞、B 细胞、 NK细胞、单核细胞和 DC 细胞等主要类型。因此,我们通过
总结文献确定各个细胞类型的关键分化标记, 并且总结目前用于人体免疫监测的标准化免疫
表型分型组合。
T 细胞
T 淋巴细胞可在 CD3 表达的基础上被免疫表型化, 随后进一步细分 CD8+( 如 杀伤性 T 细胞
和 CD4+ 辅助性 T 细胞 ) 。此外,T 细胞表型是灵活的,可以随不同的微环境发生变化;表
型也可能重叠在多个 T 细胞群体之间。 此外,T 细胞亚群的分类还可能是根据响应某些刺激
或磷酸化免疫信号蛋白(如 STAT 蛋白)而分泌的特定细胞因子水平来确定。
杀伤性 T 细胞 ( 又被称作细胞毒性 T 淋巴细胞, CD8+) 能识别抗原,这些抗原是由感染
因子释放的,并与宿主细胞结合。杀伤性 T 细胞能够识别多种细胞类型和病原体并与
之相互作用。T 细胞受体与外源抗原结合,触发细胞毒素向受感染细胞释放,导致细胞
死亡。杀伤性 T 细胞的主要鉴定标志物就是 CD8+ ,但是如果需要根据不同生理状态
下对杀伤性 T 细胞进行功能鉴定,还可以进一步增加其他标志物形成标志物组合。比
如,对杀伤性 T 细胞进一步定义幼稚、中央记忆性、效应记忆性和效应 T 细胞亚群的
经典标志物是基于趋化因子受体 7(CCR7 ;也称为 CD197) 和CD45RA (或 CD45RO )
的表达情况;对杀伤性 T 细胞进一步分析其活化状态是基于 HLA-DR 和 CD38 的表达
1-3
情况 。
辅助性 T 细胞 ( 即Th1 、Th2 、Th9 、Th17 和 Tfh 细胞等 ) 具有很少的细胞毒性活性并且
分泌对其它白细胞 ( B例如细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞或中性粒细胞 ) 起作用以清除
病原体的细胞因子。除了
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