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《临床检验基础》 实验指导 （供医学检验专业五年制本科使用） 遵义医学院医学检验系组编 2005 年 12 月 1 第一章 外周血常规检验综合评价实验 【检验流程】 熟悉检验方法及原理 试剂配制及准备 标本采集及处理 红细胞计数及血红蛋白测定 血小板计数 白细胞计数及分类计数 检验结果综合评价及临床意义探讨 实验一 红细胞计数 【目的】 掌握显微镜红细胞计数（ red blood cell count）方法。 【原理 】 用等渗稀释液将血液稀释一定的倍数，充入计数池后，在显微镜下 计数一定体积内的红细胞数量，经换算求出每升血液中的红细胞数量。 【器材 】 显微镜、改良 Neubauer计数板、试管、微量吸管、玻璃棒。 【试剂 】 红细胞稀释液（ Hayem 液）：氯化钠 1.0g，结晶硫酸钠 5.0g （或无 水硫酸钠 2.5g）蒸馏水加至 200ml 。溶解后加 20g/l 伊红溶液 1 滴，过 滤后使用。 【标本 】 外周血或抗凝血（ EDTA 抗凝）。 【操作 】 2 1．稀释液 取小试管 1 支，加红细胞稀释液 2ml 。 2 ．加血 用清洁干燥微量吸管采集末梢血或抗凝血 10ul，檫去管外余血， 轻轻 加至红细胞稀释液底部，再轻吸上清夜清洗吸管 2~3 次，立即混匀。 3．充池 混匀或用微量吸管或玻璃棒将红细胞悬液充入计数池，室温下平放 3~5min，待细胞下沉后于显微镜下计数。 4 ．计数 用高倍镜依次计数中央大方格内 4 角和正中 5 个方格内的红细胞数。 5．计算 6 10 12 红细胞 /L=N 3 25/53 103 10 3 200=N3 10 =N/1003 10 N ： 表示 5 个方格内数得的红细胞数。 25/5 ：将 5 个大方格内数得的红细胞数换算成 1 个大方格的红细胞数。 3 10 ：将 1 个大方格红细胞换算成 1ul 血液内红细胞。 6 6 3 10 ：1L＝10 ul 200：为血液的稀释倍数。 【注意事项 】 1．采血时不能过分挤压采血部位，针刺部位深度必须适当。 2 ．采血应顺利、准确，采血部位不得有水肿、发绀、冻疮、炎症等。红细胞数 量增高时可适当加大稀释倍数。 3．大小方格内压线细胞的计数遵循数上不数下、 数左不数右的原则。 避免多数 或漏数。 4 ．稀释液要过滤，小试管、计数板均须清洁干燥，以免杂质、微粒等被误认为 是细胞。 5．如无上述稀释液时，也可用新鲜配制的等渗盐水代替。 6 ．将细胞悬液充入计数池时要一次完成， 不能产生满溢、 气泡、 或充池不足的 现象。 7．红细胞在计数池中若分布不均，每个方格之间相差超过 20 个以上时要重新 充池计数。正常数值范围内， 2 次红细胞计数相差不得超过