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实验二十九 实验二十九 目的基因的PCR扩增 (Gene Amplification by PCR ) PCR 目的 • 进行体外（试管内）DNA片段扩增 • 能够扩增特异的基因 • 能够扩增至百万倍 • 优点：敏感度高、特异性强、产率高、 重复性好以及快速简便等 一、PCR基本原理 • 三步曲: 变性、退火、延伸 • 类似于DNA的体内复制。  – 变性：待扩增DNA 模板加热变性解链 – 退火：将反应混合物冷却至某一温度，使引物与靶 序列退火 – 延伸：将温度升高使退火引物在DNA聚合酶作用 下延伸。 • 这种热变性-复性-延伸的过程就是一个PCR循 环。PCR就是在合适条件下的这种循环的不 断重复。 PCR：体外由引物介导的DNA酶促合成，也叫基因扩增 变性