培养基灭菌医学知识.pptVIP

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文章如果有不当或者不妥的地方,请您联系我修改文章或者删除文章,文章来源于网络收集,如果有侵权的问题,请联系我沟通协调改正,非常感谢您! 培养基灭菌医学知识 一、消毒与灭菌区分: 所谓灭菌就是杀死一切微生物, 包含微生物营养体和芽孢。 消毒是指消亡一切致病微生物(病原体)。 二、消毒与灭菌在发酵工业中应用 牛奶巴氏消毒法: 80-95℃, 10min 发酵培养基灭菌:121℃,20min 三、灭菌方法: 1、干热灭菌: 灼烧灭菌; 加热方法有电热、红外线加热等; 相对与湿热灭菌, 干热要求时间长, 温度高(通常160℃, 2hr) 1)火焰焚烧法: 接种环、试管口等 2)干烤法: 利用热空气灭菌 使用方法: 160℃,2小时 特点: 因为空气传热穿透力差, 菌体在脱水状态下不易杀死。所以温度高、时间长。 2、湿热灭菌: 蒸气释放热量, 使微生物蛋白质变性。 特点: 温度低、时间短、灭菌效果好 原因: 1) 菌体内含水量越高, 则凝固温度越低; 2) 蒸汽冷凝会放出潜热; 3) 饱和水蒸汽穿透力强; 4) 湿热易破坏细胞内蛋白质大分子稳定 性, 关键破坏氢键结构。 湿热灭菌优点: 1)蒸气起源易, 低价无毒; 2)蒸气穿透力强灭菌根本; 3)蒸气冷凝释放热量; 4)蒸气易输送, 易调整, 易管理。 湿热灭菌缺点: 1)设备费用高; 2)不能用于怕受潮物料; 3、射线灭菌法: 1)电离辐射: χ、γ、β射线 。 原理 : 引发水和其她物质电离, 产生游离基, 破坏DNA, 从而造成细胞损伤。 特点; 穿透力强, 无专一性, 对全部生物都有杀伤作用。 适用: 菌种诱变。 2)非电离辐射(紫外线) 方法: 在波长265-266nm处, 杀菌力最强。 原理: (1)作用于DNA , 使同链DNA相邻嘧啶间形成嘧啶二聚体, 引发DNA结构变形, 阻碍正常碱基配对, 从而造成菌变异或死亡。(光复活酶可修复) (2)有氧时产生过氧化氢, 强氧化杀菌。 适用: 空气、水消毒杀菌(紫外灯)。 特点: 穿透力差。 3.过滤灭菌法 采取介质过滤方法阻截微生物达成除菌目 关键用于空气灭菌 4、化学药品灭菌 方法: 浸泡、熏蒸、喷洒、擦拭等, 常见化学药品: 1)表面消毒剂: (1)酚类: 石炭酸(苯酚), 0.1%抑菌; 1%杀菌 甲酚皂(甲酚+肥皂): 3-5%皮肤消毒 机理: 作为表面活性剂, 使膜损伤; 蛋白质变性 P.C.(石炭酸系数): 为消毒剂杀菌效率标准。 是在一定时间内(10min)被测试药剂能杀死全部供试微生物最高稀释度与达成一样效果酚最高稀释度比值。 (2)醇类: 乙醇: 70-75%杀菌效率最高 机理: 具脱水作用, 能穿透菌体进入蛋白质分子肽链间隙, 使蛋白质变性或脱水沉淀, 造成微生物死亡。 无水乙醇: 表面蛋白凝固, 保护膜, 杀菌力差 甲醇可使眼睛失明, 故不宜做消毒剂; 其她醇因不溶于水, 通常不用。 (3)醛类: 甲醛: 机理: 蛋白质烷化剂; 应用: 福尔马林(40%); 10%甲醛熏蒸, 用于空气灭菌。 (4)表面活性剂: 可降低表面张力效应物质。 机理: 使菌体细胞膜破损; 使菌体蛋白质变性。 种类: 洗必泰、新洁尔灭等 特点: 快速、根本、效率高 (5)氧化剂类: 机理: 破坏蛋白质巯基, 强氧化剂可破坏蛋白质氨基与酚羟基 碘酒 7g I: 5g KI, 溶于100ml 95%乙醇。 1%碘酒10min可杀死芽孢杆菌和部分真菌, 并使流感病毒灭活。 漂白粉(氯化钙与次氯酸钙混合物) (6)重金属及其化合物: 全部重金属盐Cu、As、Ag、Hg等对微生物都有毒性。 机理: 1)可与酶蛋白-SH基结合, 使酶失活; 2)易与带阴电荷菌体蛋白吸附, 使之变性沉淀。 应用: 波尔多液、红汞、硝酸银等。 特点: 简便。但使用应谨慎, 预防在体内积累。 (7) pH杀菌作用 酸: 蛋白质变性 无机酸:杀菌力与H+浓度成正比。 有机酸:与不电离部分成正比,故有时有机酸灭菌效果无机酸, 分子杀菌力大于离子。 碱: 强碱造成蛋白质、核酸大分子变 性、水解, 使菌死亡。 2)抗代谢药品 机理: 与正常代谢产物同时存在, 并产生竞争性拮抗作用(与对应酶竞争性结合)。只有当正常代谢产物量少或不存在时, 抗代谢物才有用。 种类: 磺胺——抑制叶酸合成 6 - 巯基嘌呤——抑

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