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全血淋巴细胞亚群免疫分型
背景知识
即使在早期通过形态学特征来区分不同功能的淋巴细胞的检测中, 对直接识别和计数方法的研究
一直在进行。 吸附方法在历史上有重要地位, 这个方法首次假设了通过一些新的分子探针来检测
膜上的受体或配体来识别细胞。 单克隆抗体被证明是检测这种表面分子极其有效的探针; 此后 CD
命名协会统一命名了与这些表面分子结合的种类繁多的抗体。 将单克隆抗体进行荧光标记后与白
细胞反应,然后在流式细胞仪上检测, 这个基本步骤使流式细胞仪在临床实验室中应用被大大拓
宽。对外周血淋巴细胞免疫分型在诊断和分型免疫缺陷性疾病中意义重大。如检测与 X染色体相
关丙球蛋白贫乏症患者外周血淋巴细胞 CD19、CD20和CD21时,会发现在疾病状态中的患者不存在
成熟 B淋巴细胞( CD19+,CD20+,CD21)。另一个例子是分析 CD43的表达,它在 Wiskott-Aldrich
综合症患者的淋巴细胞的表达降低。 区分严重的联合免疫缺陷症病例, 是通过患者淋巴细胞表面
CD3、CD4、CD8和CD38的表达来将新诊断病例来进行的。进一步的有关淋巴细胞分型在免疫缺陷
症在临床中的应用请参阅其他文献资料 (Keren et al., 1994) 。HIV病毒感和获得性免疫缺乏综
合症,是流式细胞仪免疫分型外周血淋巴细胞运用最为广泛的适用病种。 CD4阳性T细胞是 HIV感
染的主要靶分子,通过几种机制它们被催毁 , 并且其数量随着疾病的进程而下降。根据一些学术
机构的报告,临床上对潜在的感染危协而进行的抗病毒或预防治疗决定,是依据对 CD4+T细胞的
计数而做出的; 因此对这些病人的淋巴细胞亚群的精确检测就显得十分重要。 毫无疑问, 全球数
量不断增加的 HIV/AIDS病人和对 CD4+T细胞快速而精确检测的需要使得流式细胞仪使用在临床实
验室中日益广泛。 这一点很好地解释了为什么为这个单一应用发展了相关的试剂和仪器, 和一些
针对 CD4+T细胞检测的标准化程序。外周血淋巴细胞免疫分型被证明在诊断患有某些慢性淋巴细
胞增生性疾病的患者中有重要作用; 特别是 B细胞性慢性淋巴细胞白血病, 此类样本中可以通过B
细胞表面κ 和λ免疫球蛋白轻链的异常表达而识别出肿瘤细胞。对骨髓细胞免疫分型可确定慢
性B淋巴细胞白血病的亚型 (Loken et al., 1990; Ruiz-Arg üelles et al.,1998) 。在使用移植
药物后,T细胞的亚群会发生改变, 特别是 CD4+T细胞会因为免疫抑制而有特异性的改变。 病人在
服用咪唑硫嘌呤或环孢霉素后 CD4+和CD29+T细胞数量会下降,而 CD4和CD45RA阳性的T细胞会增
加。同时表达 CD4和CD57的淋巴细胞的数据,一群功能尚在研究中的细胞,会在服用咪唑硫嘌呤
的病人中增加,而在服用环孢霉素病人则不会。有些文献报道 CD4/CD8比值低的病人其排斥反应
增加的机率增大,并且会变现出对抗排斥药的耐药。 CD8+T细胞的 HLA-DR表达的增加可被识为早
期排斥反应的信号,同时是抗排斥药物疗效下降的指标。 T细胞亚群细胞比例失衡会在慢性免疫
性疾病中见到,如系统性红斑狼疮, 结缔组织疾病, 进行性系统性硬化症和风湿性疾病, 此外还
有文献表明 T细胞亚群细胞比例的改变程度与疾病的活跃程度相关。在 mononucleosic 综合症中,
CD4和CD8细胞的构成会发生戏剧性的变化, 而当其比例正常时则可认为疾病进入临
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