沈敏酵母菌种群数量的变化.pptxVIP

1 沈敏酵母菌种群数量的变化 2 实验学习内容 第1页/共22页 3 实验原理 思考： 1、酵母菌的呼吸方式。 2、酵母菌在液体培养基中繁殖其种群数量受哪些因素影响。 3、酵母菌种群数量增长的曲线类型。 第2页/共22页 4 实验设计思路 思考： 如何设置对照实验探究“酵母菌种群数量变化”？ 提示： 从影响实验室中培养的酵母菌的因素来考虑 第3页/共22页 5 实验设计思路 试管编号 A B C 试管内 液体 温度条件 对照实验设置 28℃ 5℃ 28℃ 培养液 无菌水 酵母菌 10 10 10 第4页/共22页 6 实验步骤 （1）向三支试管中加入培养液或无菌水 （2）向三支试管中接种酵母菌 （3）将三支试管在不同的温度下培养 （4）每天取样计数酵母菌 （5）分析数据画出曲线 第5页/共22页 7 血球计数板计数 第6页/共22页 8 （1）计数工具——血球计数板 实物图 正面图 侧面图 计数室 滴液处 血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。 计数时，常采用样方法。 血球计数板计数 第7页/共22页 9 （1）计数工具——血球计数板 每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。 每个计数池分为9个大方格。 血球计数板计数 第8页/共22页 10 16个小格 25个小格 25X16 = 400小格 16X25 = 400小格 每个计数室（大方格）共有400小格，总容积为3 抽样检测： 5×16=80个小格 抽样检测： 4×25=100个小格 第9页/共22页 11 血球计数板计数 思考： 1、使用16×25规格时计数几个中方格中的细胞数？即个小方格中的细胞数？ 2、设每个中方格中的细菌数分别是：A1，A2，A3，A4，稀释倍数为：B，则样品中细胞数/ml是多少？ 4个中方格，100个小方格 （A1+A2+A3+A4）/100 ×4000000×B 第10页/共22页 12 （2）计算： 每毫升培养液中的酵母菌细胞数是多少？ 第11页/共22页 13 实验数据记录 连续多天统计，每天统计多次。请设计实验数据记录表格 时间 次数 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 平均值 第12页/共22页 14 酵母菌培养： 培养液配制 灭菌 接种 培养 配制质量分数为5％的葡萄糖溶液（葡萄糖20g，1000 mL水），分装到5个烧杯中（200mL/烧杯） 用高压蒸汽灭菌锅将培养液和取样、计数时所用的滴管分别灭菌。贴标签。 接种时要在酒精灯附近，用灭菌干净的1mL刻度吸管每次吸取酵母菌母液，往每个烧杯中加入。（注意：滴加量不要太多，避免初始菌数过多。） 将烧杯置于28℃的恒温箱中培养 无菌 操作 讨论：计数前还应有哪些步骤？需注意些什么？ 第13页/共22页 15 实验注意事项 1、从试管中吸取培养液进行计数前，为什么需将试管轻轻震荡几次？ 2、若一个小方格内酵母菌数过多，难以数清，则如何处理？ 使培养液中酵母菌均匀分布，以保证估算的准确性，减少误差。 将培养液稀释一定的倍数，再重新计数。 第14页/共22页 16 注意事项： 进行计数前，应先将试管摇匀，目的是使酵母菌在培养液中混合均匀，以减少计数误差。 显微镜计数时，对于压在小方格界线上的酵母菌，应取相邻两边及顶角计数。 若一个小方格内酵母菌数量过多，难以数清时，则可将培养液稀释一定倍数后再计数。 本实验无对照实验，酵母菌每天的数量变化可形成前后对照。 血球计数板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用浸泡和冲洗的方法清洗。 实验注意事项 第15页/共22页 17 试管 编号 培养液/mL 无菌水/mL 酵母菌母液/mL 温度（℃） A 10 — 0.1 28 B 10 — 0.1 5 C — 10 0.1 28 实验结果分析 第16页/共22页 18 实验结果分析 1、分析酵母菌种群数量变化趋势的原因 2、分析影响酵母菌种群数量的因素。 养料、温度、pH及有害代谢废物等 第17页/共22页 19 实验再探究 培养空间、氧气会影响酵母菌的生长吗？ （2008年江苏卷31题）为研究酵母菌种群密度的动态变化，某同学按下表所列条件进行了A、B、C和D 共4组实验，用1000mL锥形瓶作为培养器皿，棉塞封口，在25℃下静置培养，其他实验条件均相同，定时用血球计数板计数。根据实验结果绘出的酵母菌种群密度变化曲线图如下。 第18页/共22页 20 例2:酵母菌的计数通常用血球计数板进行，血球计数板每个大方格容积为3 ，由400个小方格组成。现对某一样液进行检测，如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应先        后再计数。若多次