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植物激素分析方法的研究 植物激素分析方法的研究 PAGE PAGE / NUMPAGESPAGE5 植物激素分析方法的研究 PAGE 植物激素剖析方法的研究 纲要：植物激素在植物体内含量甚微，并且存在着大批扰乱物质，这给提取、分别和定量剖析带来很大困难。本文对20世纪50年月到现在，植物激素的提取、分别和定量剖析所采纳高效毛细管电泳（HPCE）的特色及发展应用作综合评论。 重点词：植物激素： HPLE；HPCE；GC 中图分类号：文件表记码：A 1高效毛细管电泳（ HPCE）的特色及发展应用 PHCE的特色 仪器简单 操作简易HPCE仪器结构极其简单，只需有1个高压电源，1只毛细管，1个检测器和2个缓冲溶液瓶，就能进行 HPCE实验。 剖析速度快 分别效率高 因为毛细管能克制溶液对流，拥有优秀的 散热性，同意在很高的电场下（可达 400V/cm以上）进行电 泳，所以可在很短时间内达成分别，分别效率可达 105~106 理论塔板数。 操作模式多 只需改换毛细管内填补溶液的种类、浓度、酸度或增添 剂等，就能够用同一台仪器实现多种分别模式。 实验成本低 耗费少，分别在水介质中进行，耗费的大多是价钱较低 的无机盐类；毛细管长度仅60~70cm，内径70~75mm，容积仅125ml，进样量在NL级或ne级，实验成本低。 2PHCE的发展应用 PHCE的发展 到20世纪80年月，毛细管电泳技术获得了打破性的进 展。1981年，Johnsonburg和Taluka提出了在内径小于 80μ 的毛细管中，轴向扩散是影响柱效的主要要素。他们使用 75μm内径，100cm长的毛细管，柱上荧光检测， 30KV  的 高压，分别了氨基酸和多肽物质，获取了  40万理论塔片数， 并实现了正负离子的同时分别，此项工作被以为是现在毛细 管电泳技术发展的里程碑。 1984年，Terabit等提出一种新的 毛细管电泳技术一胶束自动力学色谱 （MEKC），填补了CZE 不可以分别中性组分的缺点，进而拓展了毛细管电泳的应用范 围。1987年，Enhearten提出了毛细管等电聚焦电泳（CIEF）；Cohen和Charger发展了毛细管凝胶电泳（CGE），使得传统 的等电聚焦和凝胶电泳技术在一根毛细管中得以实现。 毛细管电泳技术的应用是 CE研究中的一大热门，应用 研究报告约占文件量的 50%以上。毛细管电泳的应用范围十 分宽泛，可分别无机离子、小分子有机物、氨基酸、肽、蛋 白质、核苷酸及药物等，此中生物样品的分别剖析是 CE应 用的一个重要领域。如人们采纳毛细管电泳技术判定合成肽 和蛋白质的纯度，绘制基因重组产物的指纹图谱进行药用蛋白质的质量监控，剖析蛋白质酶解或化学水解后的多肽片断，获取指纹图谱进行药用蛋白质的结构和性质剖析，以及 在缓冲液中加入环糊精或金属 Cu2+等增添剂用于手性分子 的分别等等。 Cohen等人初次采纳聚丙稀酰胺凝胶毛细管电泳对 DNA片断进行剖析，达到了单个碱基的分别。 采纳激光引诱 荧光检测器，CE（聚丙烯酰胺电泳）可在 1h内分别 300个碱基，敏捷度可达 10-20mol。 PHCE  在植物激素分别、剖析中的应用 国内用毛细管电泳进行了 2类激素7组分的同时分别， 即4种常有的生长素：吲哚3-5酸（IBA）、吲哚3-丙酸（IPA）、吲哚-3-乙酸（IAA）、1-萘乙酸（NAA）与3种细胞激动素： N6-异成烯腺嘌呤（即玉米素 ）、N6-呋喃甲基腺嘌 呤（KT）、6-氨基嘌呤（6-BAP）。在十二烷基硫酸钠（ SDS） 作胶来的系统中，初次用葡萄矿和三乙醇胺作混淆改良剂， 有效地改良了上述 7栽种物激素的分别度， 13min内获基线 分别。因为毛细管电泳样品的预办理较为简单，减少了样品 的消耗量，所以用MEKC方法测定较 GC及HPLC方法优胜。 总结 高效液相色谱法，只需求样品能制成溶液，而不需要气化，所以不受样品挥发性的拘束。关于低挥发性、热稳固性差，分子量大的高分子化合物以及离子型化合物尤其有益，如氨基酸、蛋白质、生物碱、核酸、筒纸、类脂、维生素及抗生素等。分子量较大，沸点较高的有机物以及无机盐类，都可用高效液相色谱法进行剖析。 参照文件 陈冰等植物生长素与细胞激动素毛细管电泳分别研究[J].化学通告，2001(4). 高鸿主编，剖析化学前沿[M]，科学第一版社， 1991.23-24. [3]袁少敏，郑本字，麦泳谊，应用 植物激素毛细管电 泳[J].华南师范大学学校（自然科学版），1990；（1）：57-60. WaleEW,BerleJ,MertensRetal.societyforex experimentalismbiologysemdinarcerise(No.29)[M]. Cambridge:cambadge