血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳.docVIP

Word可编辑 血清醋酸纤维素薄膜电泳 目的要求 掌握醋酸纤维素薄膜电泳的根本原理及操作过程。 了解猪血清蛋白质的各种成分。 熟悉猪血清中各种蛋白质相对含量的测定原理和方法。 熟悉分光光度计的工作原理及使用方法。 实验原理 电泳的根本原理 电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物分子，如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团，它们在某个特定的pH值下可以带正电或负电，在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动。电泳技术就是利用在电场的作用下，由于待别离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异，使带电分子产生不同的迁移速度，从而对样品进行别离、鉴定或提纯的技术。电泳过程必须在一种支持介质中进行。自由界面电泳没有固定支持介质，所以扩散和对流都比较强，影响别离效果。于是出现了固定支持介质的电泳，样品在固定的介质中进行电泳过程，减少了扩散和对流等干扰作用。最初的支持介质是滤纸和醋酸纤维素膜。?由于pH值的改变会引起带电分子电荷的改变，进而影响其电泳迁移的速度，所以电泳过程应在适当的缓冲液中进行，缓冲液可以保持待别离物的带电性质的稳定。 醋酸纤维素薄膜 醋酸纤维素是纤维素的羟基乙酰化所形成的纤维素醋酸酯，将它溶于有机溶剂〔如：丙酮、氯仿、氯乙烯、乙酸乙酯等〕后，涂抹成均匀的薄膜,待溶剂蒸发后那么成为醋酸纤维素薄膜。该