液质联用基础原理及应用.pdfVIP

-/ 液相色谱—质谱联用的原理及应用 液质联用与气质联用的区别 : 气质联用仪 (GC-MS)是最早商品化的联用仪器，适宜分析小分子、易挥发、热稳定、能 气化的化合物；用电子轰击方式（ EI ）得到的谱图，可与标准谱库对比。 液质联用 (LC-MS) 主要可解决如下几方面的问题：不挥发性化合物分析测定；极性化合物的 分析测定；热不稳定化合物的分析测定；大分子量化合物（包括蛋白、多肽、多聚物等）的 分析测定；没有商品化的谱库可对比查询，只能自己建库或自己解析谱图。 目前的有机质谱和生物质谱仪， 除了 GC-MS的 EI 和 CI 源，离子化方式有大气压电离 （API ） （包括大气压电喷雾电离 ESI 、大气压化学电离 APCI、大气压光电离 APPI ）与基质辅助激 光解吸电离。前者常采用四极杆或离子阱质量分析器，统称 API-MS。后者常用飞行时间作 为质量分析器， 所构成的仪器称为基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪 （MALDI-TOF-MS）。 API-MS 的特点是可以和液相色谱、毛细管电泳等分离手段联用，扩展了应用范围，包括药 物代谢、 临床和法医学、 环境分析、 食品检验、 组合化学、 有机化学的应用等； MALDI-TOF-MS 的特点是对盐和添加物的耐受能力高，且测样速度快，操作简单。 质谱原理简介： 质谱分析是先将物质离子化， 按离子的质荷比分离， 然后测量各种离子谱峰的强度而实现分 析目的的一种分析方法。 以检测器检测到的离子信号强度为纵坐标， 离子质荷比为横坐标所 作的条状图就是我们常见的质谱图。 常见术语 : 质荷比 : 离子质量 ( 以相对原子量单位计 ) 与它所带电荷 ( 以电子电量为单位计 ) 的比值 , 写作 m/Z. 峰: 质谱图中的离子信号通常称为离子峰或简称峰 . 离子丰度 : 检测器检测到的离子信号强度 . 基峰 : 在质谱图中，指定质荷比范围内强度最大的离子峰称作基峰 . 总离子流图；质量色谱图；准分子离子；碎片离子；多电荷离子；同位素离子 总离子流图 : 在选定的质量范围内，所有离子强度的总和对时间或扫描次数所作的图 , 也称 TIC 图. 质量色谱图 指定某一质量 ( 或质荷比 ) 的离子其强度对时间所作的图 . 利用质量色谱图来确定特征离子， 在复杂混合物分析及痕量分析时是 LC/MS 测定中最有用的 方式。 当样品浓度很低时 LC/MS的 TIC 上往往看不到峰，此时， 根据得到的分子量信息， 输 入 M+1或 M+23等数值， 观察提取离子的质量色谱图， 检验直接进样得到的信息是否在 LC/MS 上都能反映出来，确定 LC 条件是否合适，以后进行 MRM等其他扫描方式的测定时可作为参 考。 1.0 指与分子存在简单关系的离子，通过它可以确定分子量 . 液质中最常见的准分子离子峰是 [M+H]+ 或 [M-H]- . -/ 在 ESI 中, 往往生成质量大于分子量的离子如 M+1,M+23,M+39,M+18 称准分子离子 , 表 示为 :[M+H]+,[M+Na]+ 等碎片离子： 准分子离子经过一级或多级裂解生成的产物离子