尿液红细胞及形态-医学精品课件.pptVIP

尿液红细胞及形态学检查 血尿的概念 镜下血尿：以传统的尿离心沉渣玻片涂片，在高 倍镜下检查 10 个视野后，如每高倍视野中见到红 细胞超过 3 ～ 5 个，那么定为镜下血尿。 肉眼血尿：重症者尿呈洗肉水样或血色，称为肉 眼血尿。 尿红细胞检测方法 干化学分析法 显微镜检查法〔镜检〕 自动化尿沉渣分析仪法 单克隆抗体免疫法 干化学法 原理：利用尿液中红细胞内血红蛋白或其破坏释放出的血红蛋白均具 有过氧化物酶活性，可使过氧氢茴香素或过氧化氢烯钴释放出新生态 氧，后者可氧化有关色原 ( 如邻甲苯胺 ) 显色。因此，它既可检测红细 胞，也可检测游离血红蛋白，还可作为红细胞镜检的筛选法。 缺乏：吩噻嗪类或吩嗪类药物、肌红蛋白、对热不稳定酶、氧化剂或 细菌过氧化物酶、尿 pH 值偏高等均可使隐血出现假阳性。尿液中存在 大量维生素 C 时，可由于竞争性抑制反响而使干化学隐血出现假阴性。 显微镜检查法〔镜检〕 尿沉渣镜检的标准是：①医生要求镜检或病人的主诉、体征可能在尿 沉渣中出现除红、白细胞以外的有形成分如结晶、异常细胞等；②泌 尿系统疾病或可引发肾脏并发症的疾病；③尿液颜色、浊度、蛋白、 亚硝酸盐、红细胞、白细胞有任何一项异常者。 对于干化学筛选后的镜检问题，国内学者有争议，有学者认为镜检是 尿沉渣分析的参考标准，其重要意义是任何方法无可替代的，只要有 条件，最好每份标本都镜检。 尿红细胞镜检 是尿液红细胞检测的参考标准 。其缺乏是：①有些红细胞在肾脏长时 间滞留，受机械作用破碎或在血管内发生溶血，形成 Hb 尿，不能检出； ②标准化尿沉渣镜检操作较为繁琐〔标准化操作步骤：新鲜尿液 10ml ， 1500r/min 离心 5min 后留 尿沉渣，将尿沉渣充盈到标准尿沉渣计 数板内，计算出红细胞数 /μl 〕；③获得准确的试验结果，除需训练有 素、工作认真负责的技术人员外，还需对所用试验器材〔标本收集器 皿、离心机及计数板〕进行标准化。 自动尿沉渣分析仪 UF-100 尿沉渣分析仪对尿液中有形成分直接作荧光染色，利用流式 细胞仪原理，通过前向散射光强度 (Fsc) 、前向散射光脉冲宽度 (Fscw) 、 荧光强度 (Fls) 、荧光脉冲宽度 (Flw) 以及细胞电阻抗等参数来检测尿中 有形成分的大小、长度、染色情况，从而区分尿中的各种有形成分， 具有操作简单、结果重复性好等特点。在红细胞检测方面， UF-100 的特点之一是同时提供尿红细胞均一型和非均一型指标，对鉴别尿中 红细胞的来源有较大参考价值。 结晶、菌尿 〔草酸钙结晶和霉菌〕导致假阳性，红细胞碎片及影红细 胞相对于普通红细胞而言其荧光染色敏感度下降，荧光强度弱而造成 仪器漏检。 单克隆抗体免疫法 可将尿液中的红细胞或 Hb 与试剂中单克隆抗体结合并显色。其优点是 敏感度高、特异性好。按每个红细胞 Hb 含量为 30pg 计，尿液中含有 2 个红细胞 /μl 〔相当于 〕即可检出。其特异性表达在仅与人 Hb 起反响，假阳性率很低。由于其过于敏感，在正常人尿内含红细胞 〔 0 ～ 3/HFP 〕时，即可发生反响。因此，不适合常规尿红细胞检查。 但当常规镜检与干化学法结果不能解释时，如尿中红细胞溶解和受某 些物质干扰干化学检查阳性，而镜检未找到红细胞，应用单克隆抗体 免疫法可为尿中红细胞的性质提供鉴别诊断依据。 综合评价 尿红细胞镜检是尿液红细胞检测的参考标准，但对尿中溶 解的红细胞不能检出。 干化学法可检测 Hb ，既有助于溶血性疾病的诊断，也可 弥补镜检不能检出破坏的红细胞之缺乏，还可作为尿红细 胞镜检的筛选方法。但必须注重尿液分析仪及试剂带的质 量及在工作中可能出现的干扰因素。 综合评价 单克隆抗体免疫法检查尿液红细胞具有很好的敏感性和特 异性，但由于其过于敏感，不能用于常规检测；在镜检和 干化学法检测结果不可解释时，其有重要的鉴别诊断价值。 尿流式细胞仪检查不仅对尿红细胞定量分析有意义，而且 还能对尿红细胞形态进行分析，以确定血尿来源。但分析 过程易受某些因素的干扰，如酵母菌、精子等，当仪器出 现报警时，必须用镜检确认。 尿红细胞形态学检查 主要用于鉴别肾性血尿和非肾性血尿。 主要方法有：普通光镜、相差显微镜 、扫 描电镜 、血液分析仪 、尿液有形成分分析 仪等 。 普通光镜检查 通常，在高倍镜下 (400 倍 ) 识别非染色细胞 形态，此法由于缺乏色泽比照和立体感， 常要求观察者有丰富熟练的尿形态学经验。 改用染色法 ( 甲基绿染色，结晶紫 - 沙黄染