真核基因组提取与“核酸”有关的文档.pptx

真(Zhen)核基因组提取第一页，共五十四页。实验(Yan)目的熟悉真核DNA提取的方(Fang)法和原理掌握真核生物基因组的结构及特点第二页，共五十四页。核(He)酸制备的一般原则分离纯化核酸总的原则：①应保证核酸一级结构的完整性；②排除其它分子的污染（蛋白质、脂类、糖、有机溶剂、金属离子、外源DNA、RNA等） 。核酸纯化应达到的要求：①核酸样品中(Zhong)不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子；②其它生物大分子的污染应降低到最低程度；③排除其它核酸分子的污染。第三页，共五十四页。核酸制备时(Shi)应注意的事项:①尽量简化操作步骤，缩短提取过程。②减少化学因素对核酸(Suan)的降解（如过量酸(Suan)碱） ③减少物理因素对核酸的降解：机械剪切力（强烈震荡、渗透压急剧改变、反复冻融）和高温④防止核酸的生物降解（核酸酶的预防） 。 第四页，共五十四页。I.材料准备II.破碎细胞或包膜－内容物释放III.核酸分离、纯化IV.沉淀或吸附核酸，并去除杂质?V.核酸溶解在适量缓冲液或水中破碎细胞提取纯化核酸制备的步(Bu)骤：第五页，共五十四页。核酸制备的一般方法和原(Yuan)理核酸酶的抑制和抑制剂降低温度，改变pH及盐的浓度，都利于对核酸酶活性的抑制，但均不如利用核酸酶抑制剂更有利，当然，几个条件并用更好。对于RNA，因分(Fen)子较小，不易被机械剪切力拉断