实验二氨基酸纸层析.pptxVIP

动物生物化学实验 实验二 氨基酸纸层析 一、实验目的 了解层析法分离混合物的基本原理 学习分配层析的基本原理 掌握氨基酸纸层析的操作技术 二、实验原理 1.层析原理 利用混和物中各组分的理化性质（分子大小，形状、分子极性，吸附力，分子亲和力和分配系数等）的不同，使各组分在两相中的分布程度不同从而达到分离。层析分离中的一个相是固定的，称为固定相，另一相是流动的，称为流动相。当流动相流经固定相时，各组分由于性质不同，移动速度不同，从而使之分开。 2.层析法的种类： 依据被分离物性质不同分为：吸附层析、离子交换层析、凝胶层析、亲和层析、分配层析、聚焦层析 依据操作方式不同又分为：纸层析、柱层析、薄层层析 3.分配层析 利用混合物中各组分在两个互不相溶的溶剂中溶解性能不同，即分配分配系数不同，而将其分开。 当把一种物质在两种不混溶的溶剂中振荡时，它将在这两相中不均匀的分配。达到平衡时，这种物质在两种溶剂中的浓度之比是一个常数。该常数就是分配系数 溶质在溶剂Ⅰ（固相）中的浓度 溶质在溶剂Ⅱ（液相）中的浓度 α＝ 分配系数 4. 纸层析 以滤纸为支持物而进行的层析 固定相：滤纸纤维吸附的水 流动相：被水饱和的有机溶剂 纸层析是分配层析的一种，在滤纸上水被吸附在纤维素的纤维之间形成固定相。当有机相沿纸流动经过层