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细菌学结核分枝杆菌课稿 细菌学结核分枝杆菌课稿 PAGE / NUMPAGES 细菌学结核分枝杆菌课稿 结核分枝杆菌 一. 概述 结核分枝杆菌（ M. tuberculosis ）简称为结核杆菌（ tubercle bacilli ）。早在 1882 年，德国细菌学家郭霍（ Robert Koch，1843-1910）就已证明结核分枝杆菌是结核病的病原菌。本菌可侵犯全身各组织器官，但以肺部感染最多见。随着抗结核药物的不断发展和卫生生 活状况的改善，结核的发病率和死亡率曾一度大幅下降。 20 世纪 80 年代后，由于艾滋病和结核分枝杆菌耐药菌株的出现、免疫抑制剂的应用、吸毒、贫困及人口流动等因素，全 球范围内结核病的疫情骤然恶化。据 WHO统计，全世界约每 3 个人中就有 1 个人感染了结 核分枝杆菌，在某些发展中国家成人中结核分枝杆菌携带率高达 80%，其中约 5%～10%携带者可发展为活动性结核病。近二十年 , 由于艾滋病的流行，感染了 HIV 的结核分枝杆菌 携带者，由于病毒破坏了机体的免疫功能，发展为活动性结核病的可能性比未感染 HIV 者 高 30～50 倍，且结核的病程发展更快。此外，在 HIV 感染的发展进程中，结核是最早发生的一种机会性感染，结核病加重了 HIV 感染者或艾滋病人的疾病负担，使其更易死亡。目前全球每年约出现 8 百万结核新病例，并导致约 3 百万人死亡。中国每年死于结核病的人约 25 万之多，是各类传染病死亡人数总和的两倍多。因此，结核病又成为了威胁人类 健康的全球性卫生问题，并成为某些发展中国家和地区，特别是艾滋病高发区人群的首要死因。 结核分枝杆菌为分枝杆菌属，本属分类较多，其中结核分枝杆菌，麻风分枝杆菌和某些非结核分枝杆菌，生长较慢对人有致病性，非结核分枝杆菌根据生长速度和产色等不同又分为 4 组。 表形特性：结核分枝杆菌为细长略带弯曲的杆菌，大小1～ 4X0.4μm。牛分枝杆菌则比 较粗短。分枝杆菌属的细菌细胞壁脂质含量较高，约占干重的 60%，特别是有大量分枝菌酸（ mycolic acid ）包围在肽聚糖层的外面，可影响染料的穿入。分枝杆菌一般用 齐尼（ Ziehl- Neelsen ）抗酸染色法，以 5% 石炭酸复红加温染色后可以染上，但用3%盐酸乙醇不易脱色。若再加用美蓝复染，则分枝杆菌呈红色，而其他细菌和背景中 的物质为蓝色。近年发现结核分枝杆菌在细胞壁外尚有一层荚膜。一般因制片时遭受破坏而不易看到。若在制备电镜标本固定前用明胶处理，可防止荚膜脱水收缩。在电镜下可看到菌体外有一层较厚的透明区，即荚膜，荚膜对结核分枝杆菌有一定的保护作用。 1 结核分枝杆菌在体内外经青霉素、环丝氨酸或溶菌酶诱导可影响细胞壁中肽聚糖的 合成，异烟肼影响分枝菌酸的合成，巨噬细胞吞噬结核分枝杆菌后溶菌酶的作用可破 坏肽聚糖，均可导致其变为 L 型，呈颗粒状或丝状。异烟肼影响分枝菌酸的合成，可 变为抗酸染色阴性。这种形态多形染色多变在肺内外结核感染标本中常能见到。临床 结核性冷脓疡和痰标本中甚至还可见有非抗酸性革兰阳性颗粒，过去称为 Much颗粒。 该颗粒在体内或细胞培养中能返回为抗酸性杆菌，故亦为 L 型。 二、基因组及质粒 TB H37Rv株基因组是环状双链 DNA，共有 4403765bp 是截至该菌公布时第二大微生 物基因组。该基因组 G+C平均值 65.6%，共有 4033 个基因，功能一直的有 1734 个，另 605 个基因编码的蛋白可见于其他菌种， 推测也在 TB中存在，余下 1694 个无已知对应 蛋白，可能成为新基因。基因组 3924 个开放阅读框有 91%有潜在编码的能力，其中有 些基因具有读框内终止密码子或者移码突变，和基因组的高 G+C含量一致， ATG(61%) 是最常见的翻译起始密码子， GTG起始密码子（ 35%）使用频率也远高于枯草杆菌（ 9%） 和大肠埃希菌。 从基因组序列分析代谢途径，可发现 TB 的某些代谢途径与其他细菌很不相同。 TB 具有合成所有必须氨基酸、维生素和酶辅助因子的潜在能力。该菌具有代谢各种各样 的碳水化合物、乙醇、酮和羧酸的能力。此外，还具有许多涉及脂代谢、糖酵解、磷 酸戊糖途径、三羧酸和乙醛酸循环所必须的酶分子 结核分枝杆菌天然的对很多抗生素有抵抗力，使得治疗及其困难。该菌的药物抵抗 力主要由于其具有高度疏水的细胞壁充当渗透屏障。同时，在基因组中还发现有许多 药物抗性决定因子的编码序列，包括水解酶或者药物修饰酶，例如乙酰转移酶和很多 药物外排泵系统。 利福平是抗菌治疗的关键药物， 对该药产生耐药性的分子基础是 RNA聚合酶的改变， 突变主要集中在 rpoB 基因的 81bp 区域。与异烟肼耐药相关的突变可能是基因 kaiG 的 小量缺失