消渴汤对大鼠类胰升血糖素肽—1和胰岛素分泌的调控作用.docxVIP

消渴汤对大鼠类胰升血糖素肽—1和胰岛素分泌的调控作用 Ⅱ型糖尿病（NIDDM）是中老年人常见病，随着生活水平提高，发病率逐年上升。 类胰升血糖素肽-1（Glucagon-like peptide-1，GLP-1）是作用最强肠促胰岛素，其作用有很强糖依赖性，可以增加胰岛素前体转录和刺激胰岛素合成，是最安全降血糖物质。本实验用具有降糖作用消渴汤为处理因素。通过酶联免疫对正常及Ⅱ型糖尿病大鼠在给消渴汤后空腹及口服葡萄糖后GLP-1和胰岛素进行研究。为临床进行GLP-1治疗糖尿病提供新思路并为后续研究奠定基础。 1资料与方法 1.1实验动物及主要试剂 1.1.1健康3个月龄Wistar雄性大鼠30只，体重200～250 g（佳木斯大学动物中心）。 1.1.2消渴汤（天花粉、山药等）购于佳木斯大学附属一院，链尿佐菌素（STZ，Sigma公司），GLP-1和胰岛素酶联免疫测定盒（北京301放射免疫研究所）。 1.2动物模型建立及成功判定标准 大鼠30只，随机分成两组。一组20只有尾静脉注射25 mg/Kg STZ。2 w后测糖耐量，选15只异常者喂高脂、高糖、高热量饲料，为Ⅱ型糖尿病模型组。另一组10只大鼠不注射STZ，正常饮食，为正常对照组。实验第8 w模型组与正常组动物分别静脉取血测空腹甘油三酯与胆固醇含量，并进行葡萄糖耐量实验。以模型组中体重变化显著，糖耐量异常，葡萄糖负荷后2 h血糖值≥11.1 mmol/L，甘油三酯、胆固醇浓度升高，与正常组存在显著差异者为成功模型。 1.3药物处理 模型组随机分为二组：模型给药组（A组）、模型对照组（B组）；正常组随机分为二组：正常对照组（C组）、正常给药组（D组）。A、D组给予消渴汤3～5 mL/Kg/d；B、C组每日按照同样计算方法以蒸馏水灌胃；20 d后测定空腹、口服葡萄糖后30、60、120 min GLP-1和胰岛素水平。 1.4标本采集及测定 将1.5 mL试管预置0℃冰水中。乙醚浅麻醉，尾静脉取血1.2 mL加入装有***** u/mL抑肽酶20 μL试管中混匀，4℃下4000 rpm离心10 min，分离血清，-80℃保存。 利用生物素和抗生物素蛋白高度结合后显色原理进行GLP-1（7-36）-amide和胰岛素的浓度检测。 1.5统计学分析 采用SPSS10.0进行统计学分析，在进行组间两两比较时使用q检验；在进行多组比较时采用单因素方差分析；在进行两组比较时采用t检验。检验水准α=0.05。 2结果 2.1尾静脉注射STZ制作NIDDM大鼠动物模型 模型组体重与正常组体重、血清甘油三酯、胆固醇水平比较有显著差异（P0.05）。 2.2消渴汤对模型组和正常组大鼠空腹及口服葡萄糖后GLP-1和胰岛素的影响。A、B组空腹GLP-1和胰岛素浓度无显著差异（P0.05）；口服葡萄糖后30 min、60 min、120 min GLP-1和胰岛素差异显著（分别为P0.05，P0.01，P0.01）。C、D组在空腹及口服葡萄糖后GLP-1和胰岛素水平无显著差异（P0.05），见表2。 3讨论 GLP-1释放的调节机制非常复杂，在食物摄入初期，远端L细胞快速释放GLP-1的机制还未确定，在此环路中最有可能发挥调节作用的物质是抑胃肽（GIP）和胃泌素释放肽（GRP）。GLP-1能增强葡萄糖诱导的胰岛素分泌，增强并且刺激胰岛素基因表达与合成，GLP-1作用模式表明它可能用于糖尿病的治疗。本实验中，模型给药组较对照组表现为GLP-1和胰岛素分泌增强。 消渴汤中天花粉具有负向免疫调节作用，在体外抑制淋巴细胞对可溶性抗原的增殖，抑制PHA诱发淋巴细胞增殖；山药能降低糖尿病小鼠组织内过氧化脂质含量，糖尿病小鼠体内过氧化脂质含量增高，反映小鼠体内自由基大量产生和堆积使多器官遭到伤害。自由基对机体组织，尤其是对心脏、肝脏、胰脏和肾脏等器官损害，这可能是糖尿病并发症重要原因。麦冬多糖可减弱四氧嘧啶对胰岛B细胞损伤和改善受损伤的B细胞功能；药理研究证实，人参总皂甙刺激动物释放胰岛素作用；枸杞能提高体内超氧化物歧化酶（SOD）活性及免疫机能，对抗氧化损伤。 消渴汤可能通过神经、内分泌、免疫反应调节等改善机体的糖代谢紊乱状态，并可能通过非营养因素调节提高GLP-1和胰岛素水平，具有双向调节作用。