琼脂糖凝胶电泳检测工作dna.pptVIP

;【一】背景知识;【二】实验目的;【三】实验原理;琼脂糖浓度(%);;琼脂糖是一种线性多糖聚合物。 浓度越高，孔隙越小，其分辨能力就越强。;【四】仪器、材料与试剂;凝胶电泳系统;?凝胶成像分析系统;Lambda DNA / EcoRI + HindIII Marker（Ferments）;常用电泳缓冲液 ;电泳指示剂溴酚兰在碱性液体中呈紫兰色，一般与蔗糖、甘油或聚蔗糖400组成上样缓冲液。 作用： ①增加样品比重，以确保DNA均匀沉入加样孔内。 ②形成肉眼可见的指示带，预测核酸电泳的速度和位置。 ③使样品呈色，使加样操作更方便。 ;溴化乙锭;琼脂糖凝胶电泳检测工作dna;琼脂糖凝胶电泳检测工作dna;;【五】实验步骤;（1）制备凝胶和胶板： 45琼脂糖（ 三角瓶 ）， 煮胶，溶解，冷却至60℃(不烫手)，倒板(4-6mm)，室温下充分凝固，竖直拔下梳子 。 胶板设计（44人）： 每18孔胶板（5人X3样品+1marker），8胶板 每8孔胶板（2人X3样品+ 1marker ），2胶板;（2 ）加样： 5μl质粒DNA+1μl loading buffer ，混匀 15μlPCR产物+3μl loading buffer，混匀 10μl酶切产物+2μl loading buffer，混匀 6μlDNAMark （每板胶加一孔