基因工程的基本操作工具资料讲解.ppt

;;基因工程名称;概念的把握;实例：用大肠杆菌生产人的胰岛素;基因工程操作过程中 常用的工具和酶有哪些？ 各自的功能是什么？ 看书：P10-12;㈠　基因操作的工具;;切割位点;看P10-11例题：-G↓AATTC-解答：  ①切载体： ②切目的基因：-G↓AATTC- -G↓AATTC-    -G↓AATTC- -G↓AATTC-----G↓AATTC-  -CTTAA↑G- -CTTAA↑G-----CTTAA↑G-  -G AATTC- -G AATTC----G AATTC- -CTTAA G- -CTTAA G----CTTAA G-   ;２、基因的针线──DNA连接酶;;;“分子缝合针”——DNA连接酶;DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？为什么？ ;;;1.以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、DNA连接酶使黏性末段的碱基之间形成氢键 ;;;4、下列关于限制酶的说法正确的是 A、限制酶广泛存在于各种生物中，但微生物中很少 B、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 C、不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端 D、限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键;5、关于限制酶的说法中，正确的是（ ） A、限制酶是一种酶，只识别GAATTC碱基序列B、EcoRI切割的是G—A之间的氢键 C．限制酶一般不切割自身的DNA分子，只切割外源DNA　　 D．限制酶只存在于原核生物中 6、DNA连接酶催化的反应是( ) A．DNA复制时母链与子链之间形成氢键 B．黏性末端碱基之间形成氢键 C．两个DNA片段黏性末端之间的缝隙的连接 D．A、B、C都不正确;7、作为基因的运输工具——载体，必须具备的条件及理由是( ) A、能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因 B、具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达 C．具有某些标记基因，以便为目的基因的表达提供条件 D、能够在宿主细胞中复制并稳定保存，以便于进行筛选 8、质粒是基因工程最常见的载体，它的主要特点是 ①能自主复制 ②不能自主复制 ③结构很小 ④是蛋白质 ⑤是环状RNA ⑥是环状DNA ⑦能“友好”地“借居” A、①③⑤⑦ B、②④⑥ C．①③⑥⑦ D．②③⑥⑦;9、在受体细胞中能检测出目的基因是因为( ) A、目的基因上有标记 B、质粒具有某些标记基因 C、重组质粒能够复制 D．以上都不正确 10、关于质粒的叙述正确的是( ) A、质粒是能够自我复制的环状DNA分子 B、质粒是唯一的载体 C、重组质粒是目的基因 D、质粒可在宿主外单独复制;11、下列黏性未端属于同一限制酶切割而成的是 A、①② B、①③ C、①④ D．②③ 12、要使目的基因与对应的载体重组，所需的两种酶是 (1)限制酶(2)连接酶(3)解旋酶(4)还原酶 A、(1)(2)(3) B、(1)(2)(4) C、(1)(2) D、(1)(3);13、以下是两种限制酶切割后形成的DNA片段，分析回答问题。 (1)其中①和 是由一种限制酶切割形成的 末端，两者要重组成一个DNA分子，所用DNA连接酶通常是 。 (2) 和 是由另一种限制酶切割形成的 末端，两者要形成重组DNA片段，所用DNA连接酶通常是 。 ;基因克隆操作;基因工程的操作步骤有哪些？各个步骤如何进行？看书P12;目前被较广泛提取使用的目的基因有： 苏云金杆菌抗虫基因、人胰岛素基因、人干扰素基因、种子贮藏蛋白基因、植物抗病基因等。;提取目的基因的方法;DNA合成仪;;(三)将目的基因导入受体细胞;(四)目的基因的检测与鉴定;从苏云金芽苞杆菌中提