基因工程的基本步骤教学提纲.ppt

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;1.2基因工程的基本操作程序;独立自学:阅读教材P10-15思考:;引导探究:;归纳: 基因工程的基本操作程序;1、目的基因的获取;一、目的基因的获取;1、从基因文库中直接获取;提取某种生物的全部DNA;某种生物的单链mRNA; ;四种脱氧核苷酸(dNTP) ;目的基因的mRNA;二、基因表达载体的构建 ——基因工程的核心;2、基因表达载体的组成:;启动子:位于基因的首端的一段特殊的DNA片断,它是RNA聚合酶识别和结合的部位,有了它才能驱动基因转录出mRNA,最终获得蛋白质 终止子:位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断,能终止mRNA的转录 标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将有目的基因的细胞筛选出来;①载体与表达载体的区别:二者都有标记基因和复制原点两部分DNA片段。表达载体在载体基础上增加了目的基因、启动子、终止子三部分结构 ②用到的工具酶:既用到限制酶切割载体,又用到DNA连接酶将目的基因和载体拼接,两种酶作用的化学键都是磷酸二酯键 ③启动子、终止子对于目的基因表达必不可少 ④目的基因不能单独进入受体细胞,必需以表达载体的方式携带进去。;三、将目的基因导入受体细胞;检测—;1、将目的基因导入植物细胞的方法: (1)农杆菌转化法 ①农杆菌特点:;③过程:;2、将目的基因导入动物细胞 ①方法:显微注射法 ②程序: ; 3、将目的基因导入微生物细胞 ①原核生物特点:繁殖快、单细胞、遗传物质少 ②方法:;(一)、检测;;(二)、鉴定(个体生物学水平);;

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