基因工程载体 (2).pptVIP

一、质粒表达载体 (三)Ti质粒表达载体 T-DNA区：侵染植物时，从Ti质粒上被切割，转移到植物细胞中，带有与肿瘤形成有关的基因 毒性区（vir区）：激活T-DNA的转移 接合转移区（Con区）：存在与细菌间进行接合有关的基因 tra 复制起始区（Ori区）： 保证Ti质粒进行自我复制 Con区 第六十三页，共83页 一、质粒载体 TA克隆载体——PCR产物克隆载体 用Taq酶的PCR产物3’端加上了一个A。根据这一特点研制出一种线性质粒，其5’端突出的T，可与Taq酶的PCR产物间连接，即TA克隆。 构建方法： 如：pMD18-T，pGEM-T 载体的线性化 载体末端补平 载体末端加T 第三十一页，共83页 二、噬菌体载体 　　　噬菌体（Bacteriophage）它本身是一种核蛋白，核心是一段DNA(线性)，结构上有一个蛋白质外壳和尾巴，尾巴上的微丝可以把噬菌体的DNA注入细菌内。 第三十二页，共83页 二、噬菌体载体 噬菌体或病毒是一类非细胞微生物，能高效率高特异性地侵染宿主细胞，然后或自主复制繁殖，或整合入宿主基因组中潜伏起来，而且在一定的条件下上述两种状态还会相互转化。 能被开发成为基因工程的有用载体的原因： 1.高效率的感染性能使外源基因高效导入受体细胞； 2.自主复制繁殖性