基因工程载体植物基因工程.pptVIP

一、质粒表达载体 融合型表达载体 P SD Foreign DNA 融合型表达载体 融合基因 (一)原核表达载体 第一百二十七页，共164页 一、质粒表达载体 Ptac：IPTG诱导 GST融合蛋白—直接纯化 产物切割方便： pGEX-1?T—凝血酶 pGEX-2T---凝血酶 融合型表达载体 (一)原核表达载体 第一百二十八页，共164页 一、质粒表达载体 (一)原核表达载体 分泌型表达载体 1、主要元件： 启动子和SD序列 信号肽序列 ：SD下游，编码信号肽，可引导蛋白跨膜 2、优点：分泌表达，避免降解。 第一百二十九页，共164页 三、噬菌体-质粒杂合载体 常用的噬菌粒载体pUC118和pUC119 1. 具有较小分子量的共价、闭合、环形的基因组DNA，可 克隆10kb的外源DNA片段，并易于进行分离与操作； 2. 编码一个ampr基因作为选择记号，便于转化子的选择； 3. 拷贝数含量高，每个寄主可高达500个； 4. 存在着一个多克隆位点区； 5.可进行蓝白斑筛选； 第九十五页，共164页 三、噬菌体-质粒杂合载体 6. 插入的外源基因以融合蛋白质的形式表达； 7. 含有质粒的复制起点，克隆的外源基因可以像质粒一样按常规的方式