家兔侧脑室注射组胺受体拮抗剂对神经源性肺水肿的影响.docVIP

家兔侧脑室注射组胺受体拮抗剂对神经源性肺水肿的影响 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：家兔侧脑室注射组胺受体拮抗剂对神经源性肺水肿的影响 1 1 对象与方法 2 一氧化氮（NO）含量测定 3 2 结果 4 3 讨论 6 文2：侧脑室注射吡咯喹啉醌对大鼠学习记忆的影响 7 1 材料与方法 9 2 结 果 11 3 讨 论 11 参考文摘引言： 13 原创性声明（模板） 14 文章致谢（模板） 14 正文 家兔侧脑室注射组胺受体拮抗剂对神经源性肺水肿的影响 文1：家兔侧脑室注射组胺受体拮抗剂对神经源性肺水肿的影响 神经源性肺水肿（neurogenic pulmonary edema，NPE）是由中枢神经系统（central nervous system，C）损伤引发外周交感系统极度兴奋而导致的一种暴发性肺水肿［1］ ，起病急， 治疗 困难，死亡率高。目前众多学者认为，C损伤后，交感神经系统兴奋引发一系列外周血流动力学改变，从而导致肺损伤是NPE发生的外周机制。但C损伤引起交感神经系统兴奋的机制至今尚不清楚。中枢组胺能神经元在C有着广泛的纤维投射，具有多种生物学功能，近年来研究发现它与外周交感神经系统活性的调节密切相关。那么，中枢组胺有参与调控NPE发病过程的可能吗?本实验通过测定NPE动物脑区组胺含量以及经NPE动物的侧脑室微量注射组胺受体拮抗剂，观察组胺对外周NPE发病过程的影响，探讨中枢组胺与NPE发病的关系。 1 对象与方法 动物及分组 健康新西兰大白兔48只，体重～，雌雄不拘，由东南大学医学院动物中心提供，随机分为6组。（1）空白对照组（n=8）;（2）生理盐水（）对照组（n=8）:侧脑室注射%10μl，以排除经侧脑室埋管及经管注射药物对实验动物的影响;（3）NPE组（n=8）:制作NPE模型;（4）NPE加组（n=8）:模型兔同时经侧脑室注射%10μl，以排除经侧脑室埋管及经管注射药物对NPE动物的影响;（5）NPE加扑尔敏（CPA）组（n=8）:模型兔同时经侧脑室注入H 1 受体拮抗剂CPA（江苏盐城制药有限公司）10μl;（6）NPE加西米替丁（CTD）组（n=8）:模型兔同时经侧脑室注入H 2 受体拮抗剂CTD（江苏鹏鹞药业有限公司）10μl。 侧脑室定位、微量注射 大白兔用25%乌拉坦4ml#12539;kg -1 耳缘静脉麻醉，气管插管后置于江湾Ⅰ型立体定位仪上，根据Sawyer图谱［2］ 定位侧脑室。坐标为P 4 、H +7 、LR 5 ，侧脑室插管外径为，内径为。按坐标置入插管后，拔出插管内芯见有清亮液体溢出即为侧脑室埋管成功，用自凝牙托粉及502胶固定。微量注射时拔出内芯，插入注射管，连接液体恒速推进器推注药液。右股静脉插管抽取血标本。上述手术完毕后将动物静置30min，待其生命体征恢复平稳后造模，并在造模同时经侧脑室分别注射CPA、CTD各100g#12539;L -1 ，5min注完，留针10min。侧脑室注射等体积作为对照。 模型制备 模型制备及成功标准参照 文献 ［3］。在枕骨大孔处纵切一长为1cm的切口，用一头端略钝的7号头皮针头与动物长轴呈45°在枕骨大孔处向头端斜穿刺进入小脑延髓池，进针长度为10～14mm，回抽见有脑脊液，即匀速注入凝血酶（浙江杭康海洋生物药业股份有限公司）35U#12539;kg -1 及纤维蛋白原（上海莱士血制品有限公司）20mg#12539;kg -1 ，两药均由的%配制，注完留针10min。 模型成功标准:小脑延髓池注入凝血酶及纤维蛋白原20min后，若气管导管内出现粉红色泡沫状液体，或开胸后不挤压肺而泡沫状液体自主地溢出气管导管，即为造模成功。 荧光分光光度法测定脑区组胺含量 实验结束后放血处死动物，迅速取全脑置于冰台上，分离出下丘脑后区（posterior hypothalamic area，PHA）和延髓头端腹外侧区（rostral ventrolatral medullar，RV-LM），精确称重，荧光法测定组胺含量［4］ 。 一氧化氮（NO）含量测定 各组动物在造模后20min股静脉取血5ml。其中空白对照组和盐水对照组在各项手术操作结束静置30min后取血。血标本3000r#12539;min -1 离心10min，取血浆-4℃冰箱保存。硝酸还原酶法测定血浆NO含量［5］ 。 肺水比 计算 实验结束，放血处死动物，开胸取肺称湿重然后将标本置于70℃烤箱中烤2d至恒重，称其干重。根据公式肺水比=（肺湿重-肺干重）.肺干重计算肺水比。 水肿液蛋白.血浆蛋白值（值）计算 造模后20min从动物股静脉内抽取3ml静脉血置入肝素化的离心管内，然后