遗传育种学课件第五章.pptxVIP

1 第五章 基因工程育种Genetic engineering 基因工程是将不同生物的基因在体外人工剪切组合，并和载体（质粒、噬菌体、病毒）DNA连接，然后转入微生物或细胞内，进行扩增，并使转入的基因在细胞内表达，产生所需要的蛋白质。 2 奠定基因工程的三项关键技术 DNA的特异切割 Smith 和Nathans 获1978年诺贝尔医学奖 DNA的分子克隆 Berg（1972）将猴病毒SV40 DNA与λ噬菌体基因融合，成功构建重组DNA； Cohen 和Boyer （1973）将质粒pSC101与R的tetrkmr基因融合，并将重组DNA转化E.coli，首次实现了DNA的分子克隆。 DNA的快速测序 Sanger(1975)的酶法、Gilbert(1977)的化学法DNA快速测序技术 1980年诺贝尔化学奖：Berg, Gilbert, Sanger 3 分离或合成基因； 通过体外重组将基因插入载体； 将重组DNA导入细胞； 扩增克隆的基因； 筛选重组体克隆； 对克隆的基因进行鉴定或测序； 控制外源基因的表达； 得到基因产物或转基因动物、转基因植物 基因工程操作的主要步骤 4 第一节 基因克隆的酶学基础 一、限制性核酸内切酶restrictive endonuclease 核酸酶：通过切割相邻的两个核苷酸残基之间的