高效液相色谱仪的原理及应用.pptxVIP

高效液相色谱仪的原理及应用会计学第2页/共41页一、高效液相色谱法的定义和分类液相色谱：平板色谱和柱色谱。液相色谱：分配色谱、液固色谱、离子交换色谱、尺寸排阻色谱。气相色谱：挥发性物质，不能用于热不稳定物质分析。液相色谱：可分析各种物质，热不稳定物质，但流动相有毒，运行操作比GC难。能用GC就用GC。 第3页/共41页二、液相色谱中常用术语和参数只针对HPLC特有的，其余术语与第三章同。粒间体积（V0）：色谱柱填充剂颗粒间隙中流动相所占有的体积。孔体积（Vp） ：色谱柱中多孔填充剂的所有孔洞中流动相所占有的体积。第4页/共41页二、液相色谱中常用术语和参数柱外体积（Vext）：从进样系统到检测器之间色谱柱以外的液路部分中流动相所占有的体积。液体总体积（Vtot） ：粒间体积、孔体积和柱外体积之和。淋洗体积（V） ：从进样开始计算的通过色谱柱的实际淋洗体积。第5页/共41页三、反相高效液相色谱 由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系。其代表性的固定相是十八烷基键合硅胶(ODS柱），代表性的流动相是甲醇和乙腈。是当今液相色谱的最主要分离模式。溶质在填料表面的烃类和流动相之间进行分配。溶质在吸附于填料表面烃类上的“改良固定相”和流动相之间进行分配溶质被吸附于填料表面烃类分子上，类似吸附色谱。第6页/共41页四、正相高效液相色谱是由极性固定相和非极性（或弱极性）流动相所组成的HPL