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- 2021-12-03 发布于广东
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Abstract
PAGE II
实验一 紫外可见分光光度法测定碱木质素的酚羟基
(一)实验目的
用FC法测定漆酶活化的碱木质素酚羟基含量
(二)实验原理
碱木质素为造纸黑夜的主要成分,其难溶于水,可通过磺化使其成为两亲性的聚合物。但是因为碱木质素分子活性位点太少,可通过漆酶活化后再磺化,便可提高磺化后产物——木质素磺酸盐的磺化度。漆酶的酶活已经预先测定,单位为U/g(漆酶),漆酶的用量表示为 U/g(碱木质素)。因为碱木质素在波长为280nm处有最大吸收波长,可通过紫外可见分光光度法测定其含量,又因为香草醛标准溶液与FC试剂反应后在波长为760nm处有最大吸收波长,也可通过紫外可见分光光度法测定漆酶活化后碱木质素的酚羟基的含量(碱木质素也有类似于香草醛和FC试剂的反应)。
(三)实验步骤
1漆酶改性碱木质素
先用漆酶改性碱木质素,后对产物干燥处理。
2酚羟基含量测定
FC法步骤如下:
取120 mg干燥样品溶解并定容于100 mL容量瓶中,同时取一小部分出来稀释测浓度(波长为280nm)。
取以上溶液1 mL于25 mL容量瓶中,加入1.5 mL FC试剂,再加入15 mL去离子水稀释。
往以上溶液加入5 mL 20% Na2CO3溶液(20 g Na2CO3 溶解于100 mL容量瓶)后用去离子水定容。
将以上溶液移至150 mL锥形瓶中,在摇床中于30 ℃,200
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