《基因操作原理》课程教学大纲.docVIP

《基因操作原理》课程教学大纲 课程编码： 3043009402 课程名称： 基因操作原理 总学分： 3 总学时： 48 课程英文名称： Principles of Gene Manipulation 先修课程： 生物学，生物化学，遗传学，分子生物学等 适用专业： 生物技术, 生物科学, 应用生物技术, 生物工程等 一、课程教学目的 《基因操作原理》是伴随着生物学尤其是分子生物学的飞速发展而兴起的一门新学科。是分子生物学系列教材中的重要环节，是一门直接利用分子生物学基础知识指导分子生物学实验操作的理论与实践相结合的课程, 其上承接《分子生物学》课程，其下有《分子克隆技术》作为本课程配套的实验课程。本教材以基因工程的操作技术，即基因操作原理为主线，重点介绍在核酸水平上进行各种操作的基本原理和技术步骤，希望通过对基础原理的认识，能够理解和掌握实践中具体操作的原理和步骤，并能自主选择或设计相关的实验方法；掌握通过基因工程的方法实现物种改种和生物制药的途径和工作原理。 二、课程教学任务任务 重点介绍基因操作中的工具酶及其种类、活性和用途；质粒载体、?噬菌体载体和表达载体等的基本构成、种类和用途；重组DNA导入细菌和真核细胞的方法；DNA、RNA和蛋白质的分离及检测技术；定点诱变技术；PCR技术原理及其应用；cDNA文库和基因组文库的构建；分子杂交原理和技术；DNA序列分析的原理，通过Internet进行序列分析处理以及数据的获取。本门课程开设的指导思想在于使学生在掌握一般生物学以及分子生物学知识的基础上，掌握DNA重组，转移、表达和检测等技术的基本概念和基本原理，为日后从事基因工程和分子生物学研究打下技术操作方面的理论基础。 三、课程教学内容的结构 课程组将分子克隆的具体技术与基因研究的宏观策略按照“宏观-微观”、“微观-宏观”的方式，实现动态知识与静态基础的有机统一，主要分为四个层次： 基因操作静态知识。讲授进行基因操作必备的常用工具，包括分子克隆工具酶（14学时），分子克隆载体（24学时）； 基因操作动态知识。讲授进行基因操作的常用技术，包括生物大分子的分离、分析与检测技术，PCR技术，基因的表达，基因的诱变，基因的序列测定等（18学时）； 基因克隆的原理和策略。讲授基因文库的构建，文库筛选的策略（4学时）； 融会贯通。通过学生互动和专题课程讲座等形式（2学时），将基因操作的基础知识和研究策略融会贯通。 四、模块或单元教学目标与任务安排 绪论：基因操作的理论基础 （2学时） 教学目标：理解基因的概念，基因的结构组成和各种关键元件，掌握基因克隆的基本策略。 重点与难点: 掌握与基因操作有关的基本概念。 1.1基因的概念 （0.5） 1.1.1 什么是基因 1.1.2基因与其产物的共线性及非共线性 1.1.3 基因的重叠与可变性 1.2基因的结构组成 （1） 1.2.1启动子 1.2.2 SD序列 1.2.3 转录终止区 1.2.4 其它 1.3基因克隆的通用策略 （0.5） 1.3.1 基本步骤 1.3.2 亚克隆 基因操作工具酶（8.5学时） 教学目标：深入了解各种分子生物学常用工具酶的种类、特点和工作原理，通过实例分析，掌握各种常用工具酶的用途。 重点与难点: 要求掌握和了解限制酶与常用工具酶的种类\活性和用途, 让学生知道“基因操作原理”是靠什么“工具”来完成的。 2.1 限制酶 （3） 2.1.1限制酶的发现及其命名 2.1.2限制酶识别的序列 2.1.3 限制酶产生的末端 2.1.4末端长度对切割的影响 2.1.5位点偏爱 1.1.6酶切反应条件 2.1.7星星活性 2.1.8单链DNA的切割 2.1.9酶切位点的引入(酶切水平) 2.1.10 影响活性的因素 2.1.11 酶切位点在基因组中分布不均一性 2.2甲基化酶（1） 2.2.1甲基化酶的种类 2.2.2依赖于甲基化的限制系统 2.2.3甲基化对限制酶的酶切影响 2.3 DNA聚合酶（2.5） 2.3.1大肠杆菌DNA聚合酶 2.3.2 Klenow 酶 2.3.3 T4噬菌体DNA聚合酶 2.3.4 T7噬菌体DNA聚合酶 2.3.5 耐热DNA聚合酶(第7章中详细介绍) 2.3.6反转录酶 2.3.7末端转移酶 2.4其它工具酶（2） 2.4.1 RNA 2.4.2 连接酶 2.4.3 T4多核苷酸酶 2.4.4碱性磷酸酶 2.4.5核酸酶 2.4.6 RNA酶抑制剂 2.4.7琼脂糖酶 2.4.8 DNA单链结合蛋白 2.4.9其它 分子克隆载体（13.5学时） 教学目标：深入了解各种载体的特征和工作原理，掌握各类载体的用途。 重点与难点: 重点掌握质粒、λ噬菌体、粘粒和M13噬菌体的组成结构和用作基因克隆的工作原理，了解其它克隆载体，表达载体和其它功能性