实验方法的选择及评价..docxVIP

临床生化实验方法的选择及评价 教学目标和要求 掌握：校准物与质控物的概念及其区别，重复性实验、回收试验、干扰试验、对比实验的方法及指标的计算 熟悉：参考值 的概念，实验方法的性能标准及其评价指标、医学决定水平、 危急值 了解：方法和标准品的分级 一、方法的分级： 决定性方法、参考方法、常规方法 决定性方法(definitive method ) 准确度最高 系统误差最小 经过详细的研究，没有发现产生误差的原因或在某些方面不够明确的方法 测定结果为 确定值”，与 真值”最接近 技术要求太高，费用昂贵 不直接用于鉴定常规方法的准确性 只用于发展及评价参考方法和标准品 参考方法(referenee method ) 准确度与精密度已经充分证实的分析方法 干扰因素少，系统误差很小，与重复测定的随机误差相比可以忽略不计 有适当的灵敏度、特异性、较宽的分析范围 (线性) 在条件优越的实验室中经常使用 主要应用于鉴定常规方法，评价其误差大小，干扰因素，并决定其是否可以被接受 也用于鉴定二级标准品，为质控血清定值，也可用于评价商品试剂盒等 常规方法(routine method ) 性能指标符合临床或其它目的需要 有适当的分析范围 经济实用 偏差已知的方法(指准确度已经确定的方法，准确度不明者称为偏差未知的方法) 常规方法在作出评价以后，经有关学术组织认可，可以作为推荐方法 常见项目的方法分类 项目 决定性方法 参考方法 [ 钾 ID-MS、中子活化法 火焰光度法 「 钠 重量分析法、中子活化法 火焰光度法 氯 电量滴定法、中子活化法 电流滴定法 钙 ID-MS 原子吸收分光光度法 磷 ID-MS -- 镁 ID-MS 原子吸收分光光度法 : Glu ID-MS 己糖激酶法 项目 决定性方法 参考方法 总蛋白 -- 双缩脲法 白蛋白 -- 免疫化学法 尿素 ID-MS 尿素酶法 肌酐 ID-MS、离子交换层析法 离子交换层析法 尿酸 ID-MS 尿酸酶法(紫外) 胆红素 -- 重氮反应法 胆固醇 ID-MS Abell-Ke ndall 法 胆固醇氧化酶法 项目 决定性方法 参考方法 TG ID-MS 酶法 ALT LDH-NADH 法 AST MDH-NADH 法 GGT -- 连续监测产物生成法 CK -- NAD+偶联法 注： ID-MS :冋位素稀释一质谱法 MDH :苹果酸脱氢酶 LDH :乳酸脱氢酶 、标准物质的分级及质控物 国际标准化委员会(International Standards Organization, ISO)对标准品(参考物) 定义：它的一种或几种物 理或化学性质已经充分确定，被用于校正仪器或用于评价一种测定方法的物质。 标准品分级： 一级标准物质 二级标准物质 校准物 质控物 标准物质(standard material ) 又称参考物质(referenee material )，是一类充分均匀，并具有一个(或多个)确定特性值的材料或物质 用以校准仪器设备、评价测量方法，或给其它物质赋值 标准物质的定值结果一般表示为：标准值土总不确定度 “标准物质证书”是介绍标准物质的技术文件，是研制单位向用户提出的质量保证书和使用说明 一级标准物质 又称原级参考物 (primary referenee material ) 是已经确定的稳定而均一的物质，它的数值由决定性方法确定，或由高度准确的若干方法确定，所含杂质 也已经定量 用于校正决定性方法，评价及校正参考方法以及为 二级标准品”定值 一级标准品都有证书 认可的参考物质 认可的参考物质(Certified Referenee Material, CRM )，其特性值由建立了溯源性的程序确定，且每个标准 值都附有给定置信水平的不确定度 CRM 470由欧洲共同体参考局制备提供 CRM 470含14种血清蛋白的定值：白蛋白、 lg A、a1-抗胰蛋白酶、lg G、C3、lg M、C4、巨球蛋白、铜 蓝蛋白、前白蛋白、 C反应蛋白、转铁蛋白、酸性糖化蛋白、触珠蛋白 2.3二级标准物质 又称二级参考物( see ondary reference material) 用一级标准物质校准，参考方法定值 用于校准常规方法、为质控物定值 国内的几种二级参考物： 红细胞微粒标准物质 一GBW E 090001 胆红素标准物质 一GBW E 090002 氰化高铁血红蛋白溶液标准物质 一GBW E 090004 纯化血红蛋白标准物质 一GBW E 090011 2.4校准物(Calibrator )及校准 用二级标准物质和常规方法校准 用于对常规方法和仪器进行校准的物质即为校准物 典型产品： Roche 公司的 CFAS ( Calibrator for automation syst