第15章喂核酸研究方法.pptVIP

32P-GCTACGTA： 在A处：32P-GCT和32P-GCTACGT 在G处： 32p ，32p-GCTAC 在C处：32P-G和 32P-GCTA 在T处：32P-GC和32P-GCTACG 硫酸二甲酯（G）： *ACTTCG *ACTTCGACAG 甲酸（G+A）： *A *ACTTCG *ACTTCGA *ACTTCGACA *ACTTCGACAG 肼/Nacl（C）： *AC *ACTTC *ACTTCGA C *ACTTCGACAG 肼（C+T）： *AC *ACT *ACT T *ACTTC *ACTTCGAC *ACTTCGACAG 从下往上读：CTACGTA，末端G不能读出。 32P *ACTTCGACAG （三）RNA的测序 RNA的测序方法有3个： （1）用酶特异切断RNA链： （2）用化学试剂裂解RNA （3）逆转录成cDNA 2019年K.Mullis发明。基本步骤为： 1.设计一对引物以便有效扩增所需要的DNA序列，并尽量减少可能产生的非特异产物 2.优化反应体系：包括适量模板、引物、4种dNTP、Taq DNA聚合酶和适量Mg2+ 五、DNA聚合酶链式反应（PCR） 3.选择3个温度进行热循环： 变性94℃，45－60s； 退火，根据引物的Tm ，1min； 延伸