激活剂及抑制剂对酶活性的影响(修).pptVIP

激活剂及抑制剂对酶活性的影响 实验项目 第一页，共14页。 一、实验目的 1.掌握激活剂及抑制剂对酶活性影响的原理。 2.熟悉实验内容及操作步骤。 3.了解温度对酶活性的影响。 第二页，共14页。 二、实验原理 (一)激活剂对酶活性影响的原理 使酶由无活性变为有活性或使酶活性增加的物质称为酶的激活剂。 激活剂是指无机离子，如金属离子Mg2+、Zn2+ … 、酸根离子 Cl- 、 PO43- …和小分子有机物胆汁酸盐、VC等。 激活剂 必需激活剂 非必需激活剂 如：己糖激酶必需由Mg2+激活 如：Cl-是唾 液淀粉酶的激活剂 第三页，共14页。 淀粉 加碘呈色 紫糊精 红糊精 无色糊精 麦芽糖 紫色 淀粉酶催化淀粉逐步水解 蓝色 红色 无色 无色 还原糖 加激活剂Cl- (1％NaCl) 第四页，共14页。 (二)抑制剂对酶活性影响的原理 能够有选择地使酶的活性降低或丧失，但不能使酶蛋白变性的物质称为酶的抑制剂。 抑制剂多与酶活性必需基团结合，直接或间接的影响酶的活性中心，从而抑制酶的活性。 根据抑制剂与酶结合的紧密程度不同，又分可逆性抑制和不可逆抑制剂。 第五页，共14页。 抑制剂 可逆性抑制剂 不可逆性抑制剂 抑制剂通过非共价键或酶-底物复合物可逆性结合，使酶活性降低或丧失。采用透析或超滤等物理方法将抑制剂除去，恢复酶活性。 抑制剂通常与酶活性中心上的必需基团形成共价键，使酶失去活性。不能用透析、超滤等方法将其除去，只能靠某药物才能解除，恢复酶活性。 重金属离子Cu2+对唾液淀粉酶有抑制作用 第六页，共14页。 1. Cl-对唾液淀粉酶具有激活作用。 2.重金属离子，例如Cu2+对唾液淀粉酶有抑制作用， 很多药物是酶的抑制剂，通过对病原体内某些酶的抑制作用或改变体内某些酶的活性而发挥其治疗功效，了解酶的抑制作用是阐明药物作用机制和设计研究新药的重要途径。 激活剂及抑制剂对酶活性影响的意义 第七页，共14页。 三、实验仪器与试剂 1.仪器 烧杯、试管、点滴板、滴管、漏斗、刻度吸量管、洗耳球、水浴箱等。 2.试剂 1％淀粉液、 1％ NaCl溶液、1％CuSO4溶液、 1％NaSO4溶液、稀碘液、唾液。 第八页，共14页。 四、实验内容及操作步骤 1.收集唾液 用少量（约3～5ml）冷水漱口约1min，收集唾液至漏斗中，过滤，备用。 第九页，共14页。 2.加样 试剂（ ml ） 试管1 试管2 试管3 试管4 蒸馏水 1 ml 2 ml 1 ml 1 ml 1%NaCl 1 ml 1%CuSO4 1 ml 1%淀粉 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1%Na2SO4 1 ml 唾液 2 滴 2 滴 2 滴 2 滴 加碘现象 观察、记录实验现象。 第十页，共14页。 3. 振荡混匀，同时置于37℃水浴中，每2min取出一滴，在点滴板上做碘的呈色反应。 当点滴板上有一孔呈现无色时，取出水浴中的4支试管，各管加碘液1～3滴，摇匀。 观察4支试管的颜色，比较反应速度。 第十一页，共14页。 五、注意事项 1.刻度吸量管不能交叉使用，否则污染试剂，影响反应现象。 2.实验所用试管冲洗干净；编号1、2、3、4的烧杯及滴管取淀粉水解液时不能交叉使用，否则污染试剂，影响反应现象。 3. 做完实验所有试剂摆放好，取淀粉的刻度吸量管冲洗干净，桌面擦干净，登记签名。 4.值日生听老师安排，认真打扫，经老师批准才能离开实验室。 第十二页，共14页。 六、思考题 1.什么是激活剂和抑制剂？本实验中的激活剂和抑制剂分别是什么？ 2.四支试管中加入1％Na2SO4的目的是什么？ 第十三页，共14页。 下次实验： P76页 血糖测定 实验报告明天交，请组长负起责任。谢谢同学们配合！ 第十四页，共14页。 词语：影响 拼音：yǐngxiǎng 解释：影子和回声。多用以形容感应迅捷。《书·大禹谟》：“惠迪吉，从逆凶，惟影响。”孔传：“吉凶之报，若影之随形，响之应声，言不虚。”隋李谔《上隋高祖革文华书》：“下民从上，有同影响，争骋文华，遂成风俗。”宋叶适《大祥设醮青词》：“母亡子在，徒想音容；祝孝嘏慈，岂迷影响？”郑观应《盛世危言·商战》：“至於今则轮舟、火车，飞輓无难，电报、邮传，捷如影响。”呼应；策应。《宋书·谢晦传》：“姦臣王弘等窃弄威权，