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miRNA181a在系统性红斑狼疮患者血浆中的表达及临床意义呼（行业资料） 文档信息 主题： 关于“行业资料”中“医学资料”的参考范文。 属性： F-01H947，doc格式，正文24684字。质优实惠，欢迎下载！ 适用： 作为医学毕业资料写作的参考文献，解决如何写好实用应用文、正确编写文案格式、内容摘取等相关工作。 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：miRNA181a在系统性红斑狼疮患者血浆中的表达及临床意义呼 2 1 资料与方法 2 2 结果 4 3 讨论 5 文2：肺功能变化在支气管哮喘治疗前后中的临床意义 7 1 资料与方法 7 2 结果 8 3 讨论 9 参考文摘引言： 11 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 12 正文 miRNA181a在系统性红斑狼疮患者血浆中的表达及临床意义呼（行业资料） 文1：miRNA181a在系统性红斑狼疮患者血浆中的表达及临床意义呼 系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）是一种自身免疫介导的以免疫性炎症为突出表现、常累及多系统、多器官的自身免疫性疾病。SLE病因复杂，发病机制尚不明确，机体的免疫异常被认为是发病的关键原因。微小RNA（microRNA，miRNA）是一类广泛存在于真核生物中、长度约21～25个核苷酸的非编码小分子RNA。它可通过与靶基因mRNA序列的特异性相互作用降解mRNA或抑制靶基因的翻译，还可在特定条件下上调靶基因的蛋白表达和mRNA水平。研究表明，在自身免疫性疾病的发生与发展过程中，microRNA发挥着不可忽视的作用[1] 本研究采用实时荧光定量PCR法检测36例SLE患者和30例健康人群血浆的miRNA-181a相对表达量，并同时检测SLE患者血沉（ESR）、C反应蛋白（CRP）、免疫球蛋白IgG、IgA、IgM和补体C3、C4及系统性红斑狼疮活动指数（SLEDAI）等，分析miRNA-181a水平与这些临床指标的关系，探讨miRNA-181a在SLE疾病中的临床价值。 1 资料与方法 一般资料 选择2015年1～6月来我院门诊和住院就诊的SLE患者36例，SLE诊断均符合1997年美国风湿病学会修订的SLE诊断指南，排除患有其他全身性疾病的患者。其中男7例，女29例，年龄23～61岁，平均（37plusmn;9）岁。系统性红斑狼疮活动指数（SLEDAI）ge;6（活动期）21例，SLEDAI6（稳定期）15例；另外选取来我院健康体检正常的30例人群作为对照人群（正常对照组），排除有高血压、心脏病、糖尿病、自身免疫性疾病及其他疾病者，不得具备SLE诊断标准中的任何一条。其中男5例，女25例，年龄21～57岁，平均年龄（36plusmn;7）岁，两组间年龄、性别等差异无统计学意义。患者进入研究后即对患者进行全面的检查并根据检查情况计算其SLEDAI评分[2]。血沉的检测采用魏氏法，C反应蛋白与免疫球蛋白IgG、、IgA、IgM和补体C3、C4的检测均在Beckman coulter Immage 800上进行。本研究得到了嘉兴市第二医院医学伦理委员会的批准，所有受试对象均知情同意。 仪器与试剂 实时荧光定量PCR仪Roche Cobas Z 480购自美国Roche公司，Eppendorf D30紫外分光光度计购自Eppendorf公司，PCR引物由上海生工合成，Trizol RNA提取试剂、BIOGHC Elitefast SYbr Kit及BIOG Super Revee Tracriptase均购自Invitrogell公司。 实验方法 标本处理 取SLE患者静脉血2 mL置于EDTA抗凝管中，800 g离心10 min后吸取上清血浆至 mL EP管中，再次800 g离心10 min，取上清血浆-80℃冷冻保存，统一检测。正常对照组标本处理同前。 总RNA的提取与纯化 用 Trizol RNA提取试剂盒提取和纯化总RNA，按试剂说明书操作。应用Eppendor D30紫外分光光度仪检测总RNA 浓度和质量，检测合格者置-80℃冰箱冻存待用。 miRNA-181a的逆转录 应用BIOG Super Revee Tracriptase对提取的总RNA中miRNA逆转录成cDNA。按说明书将总RNA 5 mu;L加入反应体系，miRNA-181a逆转录反应条件：25℃ 5 min，42℃ 15 min，85℃ 5 min；转录后得到的cDNA进行real-time PCR或-20℃保存备用。 Real-time PCR 在Cobas Z 480 PCR仪器上进行qRT-PCR。以小分子RNA U