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(全国通用版)2019高考生物二轮复习优编增分练：非选择题特训13基因工程的应用 (全国通用版)2019高考生物二轮复习优编增分练：非选择题特训13基因工程的应用 (全国通用版)2019高考生物二轮复习优编增分练：非选择题特训13基因工程的应用 特训 13 基因工程的应用 1．(2018 ·广东四校联考 ) 以下图的质粒中， Tet r 为四环素抗性基因， LacZ′基因的表达 产物能使白色的大肠杆菌菌落变为蓝色。 现用 EcoRⅠ切割目的基因及质粒载体并进行连结， 将获得的重组质粒转变大肠杆菌，以对目的基因进行保留和扩增。请回答以下问题： 将目的基因和质粒载体连结需使用的工具酶是 ________________ 。为将载体导入大肠杆菌，常用 Ca2＋ 办理使之处于 ________________ 。 LacZ′基因在基因工程中起 __________ 基因的作用。为挑选导入重组质粒的大肠杆菌，应在培育基中加入 ________，挑选 ________( 填“蓝色”或“白色” ) 菌落。 (3) 若需要将这个质粒改造成基因工程表达载体，还需要插入 ________和 ________部分。将 改造后的表达载体和目的基因经 EcoRⅠ酶切连结，并成功导入受体细胞后，发现仍有部分 细胞不可以表达出目的蛋白，最可能的原由是 ____________________________________ 。 为了防止上述状况发生，最好用 ________________ 切割目的基因和表达载体。 (4) 我国对农业转基因生物实行表记制度， 比方由转基因大豆加工制成的大豆油， 标明为“本 产品加工原猜中含有转基因大豆， 但本产品已不再含有转基因成分”， 其有关的生物学依照 是________________________________________________________________________ 。 答案 (1)DNA 连结酶 感觉态 (2) 标志 四环素 白色 (3) 启动子 停止子 目的基因 与质粒载体反向连结 两种限制酶 (4) 大豆油属于脂肪，不含目的基因编码的蛋白质 分析 (1) 将目的基因和质粒载体连结需要使用的工具酶是 DNA连结酶；为将载体导入大肠 杆菌，常用 Ca2＋ 办理使之处于感觉态。 (2) LacZ′基因在基因工程中起标志基因的作用；为 挑选导入重组质粒的大肠杆菌，应在培育基中加入四环素；因为建立重组表达载体过程中 LacZ′基因已经被损坏，所以应当挑选白色菌落。 (3) 基因表达载体的构成包含目的基因、 启动子、标志基因、停止子、复制原点等；将改造后的表达载体和目的基因经 EcoR Ⅰ酶切 连结， 并成功导入受体细胞后， 发现仍有部分细胞不可以表达出目的蛋白， 最可能的原由是目 的基因与质粒载体反向连结， 为了防止上述状况发生， 最好用两种限制酶切割目的基因和表 达载体。 (4) 我国对农业转基因生物实行表记制度，比方由转基因大豆加工制成的大豆油， 标明为“本产品加工原猜中含有转基因大豆， 但本产品已不再含有转基因成分”， 其有关的 生物学依照是大豆油属于脂肪，不含目的基因编码的蛋白质。 2．(2018 ·东北五校联考 ) 透明质酸酶临床常用作药物浸透剂，当前市场上销售的透明质酸 酶主要从动物组织中提取， 成本高且提纯困难， 科研人员试试将透明质酸酶基因转入大肠杆 1 菌，使其高效表达。部分过程以下图，请回答以下问题： 步骤①代表的是基因工程操作程序中的 ________________________ ，由图可知，此步骤中，选择用限制酶 ______________去切割 DNA分子中的 ____________键。 基因工程一般选择大肠杆菌作为受体，这是因为大肠杆菌拥有 ________________________________________________________________________ 的特色。 (3) 透明质酸酶基因进入大肠杆菌， 而且 ____________________ 的过程， 称为转变。 转变时， 第一需要用 ________办理大肠杆菌，使其处于感觉态。 透明质酸酶基因导入受体细胞后，需经过_______________技术检测其能否成功转录。 答案 (1) 基因表达载体的建立 NcoⅠ和 XhoⅠ 磷酸二酯 (2) 生殖快、单细胞、遗传物 质相对较少 (3) 保持稳固和表达 Ca2 ＋ (4)RNA－ DNA分子杂交 分析 (1) 步骤①代表将目的基因即透明质酸酶基因和作为载体的质粒连结，达成基因表达 载体的建立；据图可知，要用限制酶 Nco Ⅰ和 Xho Ⅰ去切割 DNA，断开磷酸二酯键，便于 目的基因和质