PBS缓冲液的配制方宣贯.pdfVIP

PBS 缓冲液配方 不管是免疫组化，还是细胞培养中，常用到 PBS 缓冲液，下面 是我们实验室的配方，供大家参考。 我们实验室的配方： A 液： 0.1mol/L 磷酸二氢钾： 磷酸二氢钾（ KH2PO4，MW136.09 ）1.361g，加双蒸水至 100ml。 B 液： 0.1mol/L 磷酸氢二钠： 酸酸氢二钠 （Na2HPO4.2H2O，MW177.99 ）1.78g，加双蒸水至 100ml。 或者酸酸氢二钠（ Na2HPO4.12H2O，MW358.14 ）3.58g，加双蒸水 至 100ml。 pH －－ A 液 （ml ） －－ B 液（ ml ） 5.60 －－ 9.50 －－ 0.25 5.91 －－ 9.00 －－ 1.00 6.24 －－ 8.00 －－ 2.00 6.47 －－ 7.00 －－ 3.00 6.64 －－ 6.00 －－ 4.00 6.81 －－ 5.00 －－ 5.00 6.98 －－ 4.00 －－ 6.00 7.17 －－ 3.00 －－ 7.00 7.38 －－ 2.00 －－ 8.00 7.73 －－ 1.00 －－ 9.00 8.04 －－ 0.50 －－ 9.50 一般免疫组化用 PBS 都只包含 Na2HPO4?12H2O （磷酸氢二钠） NaH2PO4?2H2O （磷酸二氢钠）Nacl 用于细胞培养的 PBS 需含有氯化钾 称取 8g NaCl、0.2g KCl 、1.44g Na2HPO4和 0.24g KH2PO4,溶于 800ml 蒸馏水中，用 HCl 调节溶液的 pH 值至 7.4，最后加蒸馏水定容至 1L 即可 0.01M PBS 缓冲液 称取 NaCl 8g，KCl 0.2g ，Na2HPO4?12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g，溶 于 900ml 双蒸水中，用盐酸调 pH 值至 7.4，加水定容至 1L ，常温保 存备用。 PBS是最普遍不过的实验室缓冲液， 但其配方各异。 以下是我的总结： 母液的配制： 0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水 0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于 1000ml 水 各种浓度 PB(pH=7.4)的配制： 先 配 0.2M PB (pH=7.4 ， 100ml) ： 取 19ml 0.2mol/L 的 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。 然后 只需将 0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释 即可，如： 0.1M PB （PH=7.4） ：取 500ml 0.2M PB ，加水稀释至 1000ml 即可。 0.01M PB （PH=7.4）：取 50ml 0.2M PB ，加水稀释至 1000ml 即可。 0.02M PB （PH=7.4）：取 100ml 0.2 M PB，加水稀释至 1000ml 即可。 若需要 NaCL 的话，加入 NaCL 至 0.9% （g/100ml ）即可。 另：其它各种另 PH 值的 0.2M PB （100ml)配方 ： pH 0.2M NaH2PO4 （ml ） 0.2M Na2HPO4 （ml ） 5.7 93.5 6.5 5.8 92 8 5.9 90 10 6.0 87.7 12.3 6.1 85